[發明專利]一種固定化L-天冬酰胺酶反應器

有效

• 申請號: 201210137793.2
• 申請日: 2012-05-04
• 公開（公告）號: CN102816693A
• 公開（公告）日: 2012-12-12
• 發明（設計）人: 齊莉;喬娟;李雅萍;木肖玉
• 申請（專利權）人: 中國科學院化學研究所
• 主分類號: C12M1/40
• 分類號: C12M1/40;C12N11/14
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

1.一種制備納米金固定化L-天冬酰胺酶反應器的方法，包括下述步驟：

1）將納米金溶液與L-天冬酰胺酶溶液混勻，室溫攪拌0.5-5小時，然后置于2-8℃靜置反應12-24小時，得到L-天冬酰胺酶-納米金聚集體溶液；

2）制備內壁修飾巰基硅烷偶聯劑的毛細管柱；

3）將所述L-天冬酰胺酶-納米金聚集體溶液流經步驟2）處理后的毛細管并與其內壁充分接觸，在2-8℃放置反應12-24小時，利用巰基與納米金的反應使L-天冬酰胺酶-納米金聚集體固定于毛細管柱內壁，得到納米金固定化L-天冬酰胺酶反應器。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟1）中所述納米金溶液中納米金的平均粒徑為13-22nm。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于：步驟1）中所述納米金溶液是采用檸檬酸三鈉法制備得到的；所述L-天冬酰胺酶溶液的濃度為4.5-225.0U/mL。

4.根據權利要求1-3中任一項所述的方法，其特征在于：步驟2）中制備內壁修飾巰基硅烷偶聯劑的毛細管柱的方法如下：

1）將毛細管內壁進行活化；

2）將巰基硅烷偶聯劑與甲醇按照體積比1:4-1:1進行混合，將混合溶液流經活化后的毛細管并與其內壁充分接觸，然后室溫放置反應12-24小時，得到內壁修飾巰基硅烷偶聯劑的毛細管柱。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于：所述將毛細管內壁進行活化的方法如下：將毛細管先依次用氫氧化鈉溶液、水進行清洗；再依次用鹽酸溶液、水依次進行清洗；最后用有機溶劑沖洗，氮氣吹干。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于：所述氫氧化鈉溶液的濃度為0.1-1.0M，氫氧化鈉溶液清洗的時間為0.5-2小時；

所述鹽酸溶液的濃度為0.1-1.0M，所述鹽酸溶液的清洗時間為10-30分鐘；

所述水的清洗時間為10-30分鐘。

7.根據權利要求1-6中任一項所述的方法，其特征在于：所述毛細管柱的長度為5-50cm。

8.權利要求1-7中任一項所述方法制備得到的納米金固定化L-天冬酰胺酶反應器。

9.納米金作為酶固定化材料在制備固定化L-天冬酰胺酶中的應用。