[發(fā)明專(zhuān)利]腦膜炎奈瑟氏菌的特異性檢測(cè)和鑒別用引物探針組合和試劑盒

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210137052.4
• 申請(qǐng)日: 2012-05-07
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102643920A
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-08-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 文鋒
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 鎮(zhèn)江和創(chuàng)生物科技有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12Q1/68
• 分類(lèi)號(hào): C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/36
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.一種用于特異性檢測(cè)樣品中腦膜炎奈瑟氏菌(通用)、腦膜炎奈瑟氏菌A群和腦膜炎奈瑟氏菌C群核酸的引物組合，這套序列組合特征在于包括下列引物：

P1：5`-GGCTGCGGTAGGTGGTTC-3`，

P2：5`-TTCCAAAGCCACCGTGCG-3`，

P3：5`-ACGAAGAAATTATGCCACAAAGTG-3`，

P4：5`-GAAGTCGTCATTGCTGTAAATAAAATAG-3`。

P5：5`-TTCAATGCTAATGAATACCACCGT-3`，

P6：5`-GGTATTTGTCTTGAATTTTAGCAATAG-3`。

2.一種用于特異性檢測(cè)樣品中腦膜炎奈瑟氏菌(通用)、腦膜炎奈瑟氏菌A群和腦膜炎奈瑟氏菌C群核酸的引物和寡核苷酸探針組合，其中引物為權(quán)利要求1所述的引物，寡核苷酸探針為：

Probe1：5`-X<sub>1</sub>-CCAATGTGCAGCTAACACGTGGCAATG-Y<sub>1</sub>-3`，

Probe2：5`-X<sub>2</sub>-CCAGCTTGCACCATATACCAGGAATTAGT-Y<sub>2</sub>-3`。

Probe3：5`-X<sub>3</sub>-TGCACATTCAGGCGGGATTAGCACA-Y<sub>3</sub>-3`。

X₁、X₂和X₃為熒光報(bào)告基團(tuán)，Y₁、Y₂和Y₃為熒光淬滅基團(tuán)。

3.如權(quán)利要求2所述，這套序列組合特征還在于，其中Probe1熒光報(bào)告基團(tuán)X₁為Fam，熒光淬滅基團(tuán)Y₁為Eclipse，Probe2熒光報(bào)告基團(tuán)X₂為Hex，熒光淬滅基團(tuán)Y₂為Eclipse，Probe3熒光報(bào)告基團(tuán)X₃為Cy5，熒光淬滅基團(tuán)Y₃為BHQ3。

4.如權(quán)利要求2所述，這套序列組合特征還在于，可用于三重實(shí)時(shí)熒光聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)，即一個(gè)反應(yīng)體系可同時(shí)檢測(cè)腦膜炎奈瑟氏菌(通用)、腦膜炎奈瑟氏菌A群和腦膜炎奈瑟氏菌C群核酸。

5.一種用于特異性檢測(cè)樣品中腦膜炎奈瑟氏菌(通用)、腦膜炎奈瑟氏菌A群和腦膜炎奈瑟氏菌C群核酸的試劑盒，其中包括PCR反應(yīng)液、酶混合液、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品。其特征在于PCR反應(yīng)液中用于核酸擴(kuò)增反應(yīng)的引物序列如下：

P1：5`-GGCTGCGGTAGGTGGTTC-3`，

P2：5`-TTCCAAAGCCACCGTGCG-3`，

P3：5`-ACGAAGAAATTATGCCACAAAGTG-3`，

P4：5`-GAAGTCGTCATTGCTGTAAATAAAATAG-3`。

P5：5`-TTCAATGCTAATGAATACCACCGT-3`，

P6：5`-GGTATTTGTCTTGAATTTTAGCAATAG-3`。

6.如權(quán)利要求5所述的試劑盒，其特征在于PCR反應(yīng)液中用于熒光信號(hào)監(jiān)測(cè)的寡核苷酸探針的序列如下：

Probe1：5`-X<sub>1</sub>-CCAATGTGCAGCTAACACGTGGCAATG-Y<sub>1</sub>-3`，

Probe2：5`-X<sub>2</sub>-CCAGCTTGCACCATATACCAGGAATTAGT-Y<sub>2</sub>-3`。

Probe3：5`-X<sub>3</sub>-TGCACATTCAGGCGGGATTAGCACA-Y<sub>3</sub>-3`。

X₁、X₂和X₃為熒光報(bào)告基團(tuán)，Y₁、Y₂和Y₃為熒光淬滅基團(tuán)。