[發明專利]一種利用保加利亞乳桿菌發酵產乳酸的方法

無效

• 申請號: 201210135060.5
• 申請日: 2012-05-04
• 公開（公告）號: CN102643876A
• 公開（公告）日: 2012-08-22
• 發明（設計）人: 張斌
• 申請（專利權）人: 蘇州百趣食品有限公司
• 主分類號: C12P7/56
• 分類號: C12P7/56;C12R1/225
• 代理公司: 江蘇致邦律師事務所 32230
• 代理人: 王偉

技術領域

本發明屬于發酵技術領域，具體涉及一種利用保加利亞乳桿菌發酵產乳酸的方法。

背景技術

乳酸是一種重要的有機酸，學名α-羥基丙酸，在分子結構中有一個不對稱碳原子，因此乳酸存在兩種異構體，即L-(+)乳酸和D-(-)乳酸。作為一種重要的生物化工原料，L-乳酸被廣泛應用于食品、醫藥、現代農業、日用化工、有機化工等領域，覆蓋大量產品。

????乳酸可以通過化學合成或碳水化合物發酵得到，但是基于發酵法能夠專一性地得到L-乳酸或D-乳酸，因此發酵法被廣泛用于L-乳酸的生產。乳酸桿菌發酵生產乳酸具有光學純度高、發酵強度顯著提高等特點，因此，利用乳酸桿菌發酵生產乳酸成為大規模生產L-乳酸的趨勢。

目前用于乳酸生產的原料主要有淀粉、糖蜜、乳清粉等。為了降低乳酸的制備成本，提高乳酸生產質量，國內外對乳酸生產的研究，主要集中在低價原料的開發利用、提高發酵強度、優化乳酸分離提取工藝這三個方面。

發酵法生產乳酸最早見于1841年的Boutron和Fremy的記載中，其生產方法是將麥芽或酸乳放入淀粉或牛乳中使其自然發酵，然后用碳酸鈣逐漸中和所產生的乳酸。實際的工業生產始于1881年的美國阿伏利公司，其以玉米、小麥、大米、紅薯等淀粉為原料，首先將淀粉糖化，加入碳酸鈣，然后加入乳酸菌發酵3-6天。

細胞數量是影響乳酸菌發酵性能的關鍵因素，由于乳酸菌具有很弱的蛋白水解能力，利用蛋白水解物作為乳酸菌生長增殖劑添加到培養基中，提高培養基中多肽和氨基酸含量，使乳酸菌在生長過程中縮短延遲期，延長對數期和穩定期，大幅度提高細胞數量，從而通過廉價蛋白水解物促乳酸菌增殖降低生產成本，提高經濟效益。

發明內容

本發明的目的在于提供了一種利用保加利亞乳桿菌發酵產乳酸的方法，通過添加大豆蛋白水解物提高菌株生長，使乳酸菌在生長過程中縮短延遲期，延長對數期和穩定期，大幅度提高細胞數量，進而提高菌株產乳酸能力，從而通過廉價蛋白水解物促乳酸菌增殖降低生產成本，提高經濟效益。

1.??????一種利用保加利亞乳桿菌發酵產乳酸的方法，其特征在于通過添加大豆蛋白水解物提高菌株生長，使乳酸菌在生長過程中縮短延遲期，延長對數期和穩定期，大幅度提高細胞數量，進而提高菌株產乳酸能力，從而通過廉價蛋白水解物促乳酸菌增殖降低生產成本，提高經濟效益。

2.??????步驟1所描述的方法，具體步驟如下：

（1）????用接種環從菌株冷藏斜面挑取一菌環接種到裝有60mL?MRS活化液體培養基的100mL密封玻璃瓶中，37℃，150rpm，密封培養48h。

（2）????以無菌吸管按5%（v/v）比例將MRS培養液轉接于種子培養基中，37℃，150rpm密封培養48小時，重復轉接三次，種子培養基的體積可根據實驗需要逐步增大。

（3）????將種子液按15%（v/v）比例接入裝有150mL發酵培養基的250mL的醫用葡萄糖注射瓶中，37℃靜置培養72小時，發酵初期加入一定量的大豆蛋白水解物。

3.??????步驟2所述MRS活化液體培養基（g/L）:?葡萄糖20，酵母膏4，蛋白胨10，牛肉膏8，吐溫80?1mL，KH₂PO₄?2，NaAc?5，檸檬酸二銨?2，MgSO₄?0.2，MnSO₄?0.04，蒸餾水1000mL。

4.??????步驟2所述的種子培養基（%）：葡萄糖5%，蛋白胨0.5%，酵母粉0.5%，MgSO₄?0.05%，NaCl?0.01%，KH₂PO₄?0.05%。

5.??????步驟2所述的發酵培養基（%）：葡萄糖?8%，蛋白胨0.5%，蛋白粉0.5%，MgSO₄?0.05%，NaCl?0.01%，KH₂PO₃?0.05%。

6.??????步驟2所述的大豆蛋白水解物：大豆蛋白水解物是以5％大豆分離蛋白為基質，經90℃水浴中預熱15min，冷卻，調節pH?至8.0。按4000U/g?加入堿性蛋白酶，50℃水浴作用6h。在反應過程中，滴加2.0mol/L?NaOH維持pH?穩定。反應結束后85℃加熱10min?鈍化酶，離心取上清液。

7.??????步驟2（3）所述的最優接種量為15%。

8.??????步驟2（3）所述的大豆蛋白水解物添加量0.5%。?