[發明專利]一種螺旋藻多糖及其提取方法有效
| 申請號: | 201210134354.6 | 申請日: | 2012-05-03 |
| 公開(公告)號: | CN102633901A | 公開(公告)日: | 2012-08-15 |
| 發明(設計)人: | 丁侃;李俊;姚健;倪鑫淼 | 申請(專利權)人: | 昆明振華制藥廠有限公司;中國科學院上海藥物研究所 |
| 主分類號: | C08B37/00 | 分類號: | C08B37/00;A61P35/00;A61P3/10;A61P37/04;A61P39/06 |
| 代理公司: | 昆明正原專利商標代理有限公司 53100 | 代理人: | 金耀生 |
| 地址: | 650000 云*** | 國省代碼: | 云南;53 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 螺旋藻 多糖 及其 提取 方法 | ||
1.一種螺旋藻多糖的提取方法,其特征在于按以下步驟進行:
?1)取螺旋藻生藥材,加質量濃度?95%工業乙醇室溫下浸泡七天,傾去乙醇,固體物晾干,然后用沸水進行多次提取,每次提取時間為4小時,用苯酚-硫酸法檢測提取液的糖含量,至糖反應不明顯為止,每次的提取液經過濾后合并,加熱濃縮至小體積,對流動水透析2天,透析內液濃縮后離心,加入質量濃度30%的三氯乙酸(體積比,1:1?v/v)溶液去除蛋白,在4度條件下反應4小時,加質量濃度10%?NAOH溶液v/v中和至pH值為6.5~7.5后,扎袋對流動水透析48小時,透析內液濃縮后離心,上清液加入三倍體積的質量濃度95%工業乙醇,靜置過夜,離心收集沉淀,分別經無水乙醇和丙酮洗滌后,于80?℃干燥,得水提螺旋藻粗多糖;
2)沸水提取后的固體殘渣在4?℃下用5%?v/v?NaOH溶液浸提3小時,間歇攪拌,過濾,用10%?v/v?HCl溶液中和至pH?6.5~7.5,扎袋對流動水透析2天,透析內液濃縮后離心,上清液加入三倍體積的?v/v?95%工業乙醇沉淀,靜置過夜,離心收集沉淀,分別經無水乙醇和丙酮洗滌后,于80?℃干燥,得堿提螺旋藻粗多糖;
3)水提螺旋藻粗多糖用DEAE-纖維素陰離子交換柱層析進行分離,用去離子水和不同離子強度0.1,0.2,0.3和0.5?mol/L的NaCl溶液進行分步洗脫,分別從去離子水、0.1、0.2,0.3和0.5?mol/L?NaCl溶液的洗脫液中分離得到五個組分,洗脫液對去離子水透析,透析內液減壓濃縮并冷凍干燥,所得產物分別命名為LXZ-W,LXZ-0.1,LXZ-0.2,LXZ-0.3,LXZ-0.5,取LXZ-W樣品用0.2mol/L氯化鈉溶解,離心,上清液上S-300凝膠柱,用0.2?mol/L氯化鈉洗脫液洗脫得LXZ-W-300組分,經HPLC檢測為一純多糖,分子量在3~10?×?104?Da。
2.一種用權利要求1所述的螺旋藻多糖的提取方法提取得到的螺旋藻多糖,其化學結構特征為:主鏈由1,?4-連接α-D-葡萄糖構成,平均每8個主鏈殘基上有一個分支,取代在分支點的6位,分支由1個或2個1?6連接的葡萄糖構成,結構式如下:
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