[發(fā)明專利]一種徑向流耦合超濾分離制備銅藻多糖的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201210133553.5 | 申請日： | 2012-04-28 |
| 公開（公告）號： | CN102649823A | 公開（公告）日： | 2012-08-29 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 邵平;楊君;葉超凡;孫培龍 | 申請（專利權(quán)）人： | 浙江工業(yè)大學 |
| 主分類號： | C08B37/00 | 分類號： | C08B37/00;A24B15/24;A24B3/12 |
| 代理公司： | 杭州天正專利事務(wù)所有限公司 33201 | 代理人： | 黃美娟;王兵 |
| 地址： | 310014 浙江省*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 徑向 耦合 超濾 分離 制備 多糖 方法 | ||
一、技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及一種徑向流耦合超濾分離制備銅藻多糖的方法及其應(yīng)用。
二、背景技術(shù)
銅藻俗稱“丁香屋”(中國南麂島)，隸屬于馬尾藻屬。銅藻是北太平洋西部特有的暖溫帶性海藻，不連續(xù)分布在我國沿海，是提取褐藻膠的重要原料，因富含有益的生源要素而被廣泛應(yīng)用到醫(yī)藥、食品、飼料和有機肥料方面。研究表明：銅藻藻體含褐藻酸、褐藻淀粉、甘露醇及多種氨基酸、多糖、蛋白質(zhì)、維生素等。銅藻具有消痰軟堅、清熱利水的功效。近年來，國內(nèi)外專家對于銅藻的研究主要集中在銅藻養(yǎng)殖和生物學研究，對于銅藻多糖的研究較少，有研究表明：銅藻多糖添加到煙絲中后能夠使煙氣柔和、細膩和生津感，煙氣干燥感下降，并且對卷煙風格特征無影響，因此銅藻多糖的開發(fā)和用途是一個有待于進一步研究的新課題。
多糖的分離純化的研究使得多糖這一高分子聚合物在生命科學領(lǐng)域的研究有重大發(fā)展，傳統(tǒng)的多糖分離純化采用軸向流色譜分離，該技術(shù)的不足之處在于分離純化步驟復雜，所需時間較長；而用徑向流純化多糖雖然處理量大，處理時間短，但是純化效果較低，如蛋白質(zhì)的一般脫除率在80％左右；利用超濾技術(shù)純化多糖，不同的超濾膜的純化效率不同，但純化效率較高的蛋白質(zhì)脫除率也僅80％左右，達不到煙草添加劑所需要求。而利用徑向流耦合超濾的方法不僅在分離純化效果上與軸向相當，可達到95％以上甚至99％，且該方法又繼承了處理速度快、處理量大優(yōu)點，是一種新型的適用于工廠化的多糖分離純化方法。
三、發(fā)明內(nèi)容
發(fā)明的目的旨在提供一種銅藻多糖分離純化的方法，即采用徑向流色譜和超濾的分離純化方法，該方法相比傳統(tǒng)軸向的分離柱具有分離速度快、處理量的優(yōu)勢，相比單獨利用徑向流或超濾在分離效果上有一定提高，并且從銅藻中分離得到銅藻多糖的三個組分：分子量10KD以下，分子量10KD到100KD，分子量100KD以上，其中分子量10KD以下、分子量10KD到100KD的組分在提高卷煙的質(zhì)量、保潤性，降低吸食刺激性方面相比另一個組分和粗提液有一定的提高。
本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：
一種徑向流耦合超濾分離制備銅藻多糖的方法，所述方法包括以下步驟：
(1)將銅藻洗凈、干燥粉碎得銅藻粉末，加入質(zhì)量為銅藻粉末質(zhì)量50-60倍的水，在400-500W的超聲條件下提取20-30min，提取液經(jīng)離心分離和抽濾后，取濾液濃縮并冷凍干燥，得銅藻粗多糖；
(2)將步驟(1)得到的銅藻粗多糖加水配制得到5～10mg/ml濃度的銅藻粗提液，加入裝填有弱堿性陰離子交換樹脂的徑向流色譜柱中，用純水洗脫，徑向流色譜的條件為：上樣流速/柱高為1-2ml/(min·cm)，洗脫速度/柱高為8-12ml/(min·cm)，柱體積/上樣量為2-5mL/mL，洗脫30min-40min，收集得到洗脫液；
(3)將步驟(2)得到的洗脫液通過10KD的超濾膜，膜壓力控制在0～30psi，收集濾過液A，濃縮、冷凍干燥得到分子量10KD以下的銅藻多糖組分A，將截留液A再通過100KD的超濾膜，膜壓力控制在0～30psi，收集濾過液B，濃縮、冷凍干燥得到分子量為10KD到100KD的銅藻多糖組分B，將截留液B濃縮、冷凍干燥得到100KD以上的銅藻多糖組分C。
所述步驟(2)中，所述弱堿性陰離子交換樹脂為A103S、A105或A100，優(yōu)選A103S。
所述步驟(1)中，所述銅藻粉末的目數(shù)為20-100目。
所述步驟(1)中，所述干燥是在55～65℃下烘干。
所述步驟(1)中，提取液經(jīng)離心分離和抽濾，是將提取液在10000r/min高速離心，所得上清液經(jīng)抽濾，得到濾液。
本發(fā)明還提供按上述方法制備得到的分子量10KD以下的銅藻多糖組分A或分子量10KD到100KD的銅藻多糖組分B。
所述的銅藻多糖組分A或銅藻多糖組分B可應(yīng)用在卷煙中，在提高卷煙的質(zhì)量、保潤性，降低吸食刺激性方面相比另一個組分分子量100KD以上和粗提液以及經(jīng)過徑向流色譜純化的洗脫液都有一定的提高。
具體的，所述應(yīng)用的方法為：將銅藻多糖組分A或銅藻多糖組分B按保潤有效成分(即其中含有的多糖類成分含量)為煙絲質(zhì)量的萬分之二，溶解在蒸餾水中噴灑到煙絲上，然后制備成卷煙，其中每25g煙絲所噴灑的溶液體積保持在3-5ml之間。
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