[發(fā)明專利]一種蛋白質(zhì)結(jié)晶裝置和利用該裝置進(jìn)行蛋白質(zhì)結(jié)晶的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210133165.7
• 申請日: 2012-05-03
• 公開（公告）號: CN102659916A
• 公開（公告）日: 2012-09-12
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 尹大川;陳瑞卿;劉永明;鹿芹芹;何進(jìn);馬曉亮;商澎
• 申請（專利權(quán)）人: 西北工業(yè)大學(xué)
• 主分類號: C07K1/14
• 分類號: C07K1/14;C12N9/00;C12N9/36;C12N9/08;C12N9/50;C12N9/90;C12N9/22;C12N9/56
• 代理公司: 西北工業(yè)大學(xué)專利中心 61204
• 代理人: 顧潮琪

1.一種蛋白質(zhì)結(jié)晶裝置，包括結(jié)晶本體和密封部件，其特征在于：在結(jié)晶本體上設(shè)有凹槽，用于放置待結(jié)晶的蛋白質(zhì)溶液，密封部件覆蓋在結(jié)晶本體上，密封所述的凹槽，形成密封的蛋白質(zhì)結(jié)晶空間。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蛋白質(zhì)結(jié)晶裝置，其特征在于：所述的凹槽分別設(shè)置在結(jié)晶本體的兩個相對的側(cè)面上。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蛋白質(zhì)結(jié)晶裝置，其特征在于：所述的密封部件選擇透明膠帶、結(jié)晶封板膜、結(jié)晶專用密封膠帶或透明的密封膜中的一種。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蛋白質(zhì)結(jié)晶裝置，其特征在于：所述的結(jié)晶本體選擇透明材質(zhì)的材料制成，包括有機(jī)玻璃、鋼化玻璃、塑料、石英玻璃、高硅氧玻璃、普通平板玻璃、鉛硅酸鹽玻璃、鋁硅酸鹽玻璃、硼硅酸鹽玻璃或鈉鈣玻璃。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蛋白質(zhì)結(jié)晶裝置，其特征在于：所述的凹槽的底部還設(shè)有若干相互分離的儲液槽，用于放置蛋白質(zhì)結(jié)晶溶液，并且使得放置于儲液槽內(nèi)的蛋白質(zhì)結(jié)晶溶液相互分離，不會相互混合或聚集。

6.一種利用權(quán)利要求1所述裝置進(jìn)行蛋白質(zhì)結(jié)晶的方法，其特征在于包括下述步驟：

1)將蛋白質(zhì)加入到緩沖溶液中，溶解，然后通過過濾去除雜質(zhì)，制成蛋白質(zhì)溶液；

2)將蛋白質(zhì)結(jié)晶篩選試劑盒中的結(jié)晶劑轉(zhuǎn)移到蛋白質(zhì)結(jié)晶裝置的同一個凹槽內(nèi)，結(jié)晶劑之間相互分離，彼此不接觸，然后將蛋白質(zhì)溶液轉(zhuǎn)移到蛋白質(zhì)結(jié)晶裝置的凹槽內(nèi)與蛋白質(zhì)結(jié)晶劑混合制得不同結(jié)晶條件的蛋白質(zhì)結(jié)晶溶液；

3)用密封部件密封蛋白質(zhì)結(jié)晶裝置的凹槽，于恒溫條件下靜置，結(jié)晶。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的蛋白質(zhì)結(jié)晶的方法，其特征在于：所述的步驟1)中蛋白質(zhì)包括溶菌酶、過氧化氫酶、糜蛋白酶原A?II、刀豆球蛋白、蛋白酶K、葡萄糖異構(gòu)酶、索馬甜蛋白、核糖核酸酶A?VII或枯草桿菌蛋白酶A?VII；緩沖溶液選擇醋酸-醋酸鈉緩沖液、HEPES-Na緩沖液、磷酸鹽緩沖液或檸檬酸鹽緩沖液；蛋白質(zhì)溶液的濃度＞0，并且≤50mg/m。

8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的蛋白質(zhì)結(jié)晶的方法，其特征在于：所述的步驟2)中蛋白質(zhì)結(jié)晶試劑與蛋白質(zhì)溶液的體積之比為0.1-10∶1；分裝于結(jié)晶裝置凹槽內(nèi)的各蛋白質(zhì)結(jié)晶溶液的體積為0.05～4μL。

9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的蛋白質(zhì)結(jié)晶的方法，其特征在于：所述的步驟3)中恒溫選自0-60℃溫度范圍中的任何一種溫度；靜置時間為24～240小時。