[發(fā)明專利]一種蛋白質(zhì)結(jié)晶裝置和利用該裝置進(jìn)行蛋白質(zhì)結(jié)晶的方法無(wú)效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201210133165.7 | 申請(qǐng)日: | 2012-05-03 |
| 公開(kāi)(公告)號(hào): | CN102659916A | 公開(kāi)(公告)日: | 2012-09-12 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 尹大川;陳瑞卿;劉永明;鹿芹芹;何進(jìn);馬曉亮;商澎 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 西北工業(yè)大學(xué) |
| 主分類號(hào): | C07K1/14 | 分類號(hào): | C07K1/14;C12N9/00;C12N9/36;C12N9/08;C12N9/50;C12N9/90;C12N9/22;C12N9/56 |
| 代理公司: | 西北工業(yè)大學(xué)專利中心 61204 | 代理人: | 顧潮琪 |
| 地址: | 710072 *** | 國(guó)省代碼: | 陜西;61 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 蛋白質(zhì) 結(jié)晶 裝置 利用 進(jìn)行 方法 | ||
1.一種蛋白質(zhì)結(jié)晶裝置,包括結(jié)晶本體和密封部件,其特征在于:在結(jié)晶本體上設(shè)有凹槽,用于放置待結(jié)晶的蛋白質(zhì)溶液,密封部件覆蓋在結(jié)晶本體上,密封所述的凹槽,形成密封的蛋白質(zhì)結(jié)晶空間。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蛋白質(zhì)結(jié)晶裝置,其特征在于:所述的凹槽分別設(shè)置在結(jié)晶本體的兩個(gè)相對(duì)的側(cè)面上。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蛋白質(zhì)結(jié)晶裝置,其特征在于:所述的密封部件選擇透明膠帶、結(jié)晶封板膜、結(jié)晶專用密封膠帶或透明的密封膜中的一種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蛋白質(zhì)結(jié)晶裝置,其特征在于:所述的結(jié)晶本體選擇透明材質(zhì)的材料制成,包括有機(jī)玻璃、鋼化玻璃、塑料、石英玻璃、高硅氧玻璃、普通平板玻璃、鉛硅酸鹽玻璃、鋁硅酸鹽玻璃、硼硅酸鹽玻璃或鈉鈣玻璃。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蛋白質(zhì)結(jié)晶裝置,其特征在于:所述的凹槽的底部還設(shè)有若干相互分離的儲(chǔ)液槽,用于放置蛋白質(zhì)結(jié)晶溶液,并且使得放置于儲(chǔ)液槽內(nèi)的蛋白質(zhì)結(jié)晶溶液相互分離,不會(huì)相互混合或聚集。
6.一種利用權(quán)利要求1所述裝置進(jìn)行蛋白質(zhì)結(jié)晶的方法,其特征在于包括下述步驟:
1)將蛋白質(zhì)加入到緩沖溶液中,溶解,然后通過(guò)過(guò)濾去除雜質(zhì),制成蛋白質(zhì)溶液;
2)將蛋白質(zhì)結(jié)晶篩選試劑盒中的結(jié)晶劑轉(zhuǎn)移到蛋白質(zhì)結(jié)晶裝置的同一個(gè)凹槽內(nèi),結(jié)晶劑之間相互分離,彼此不接觸,然后將蛋白質(zhì)溶液轉(zhuǎn)移到蛋白質(zhì)結(jié)晶裝置的凹槽內(nèi)與蛋白質(zhì)結(jié)晶劑混合制得不同結(jié)晶條件的蛋白質(zhì)結(jié)晶溶液;
3)用密封部件密封蛋白質(zhì)結(jié)晶裝置的凹槽,于恒溫條件下靜置,結(jié)晶。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的蛋白質(zhì)結(jié)晶的方法,其特征在于:所述的步驟1)中蛋白質(zhì)包括溶菌酶、過(guò)氧化氫酶、糜蛋白酶原A?II、刀豆球蛋白、蛋白酶K、葡萄糖異構(gòu)酶、索馬甜蛋白、核糖核酸酶A?VII或枯草桿菌蛋白酶A?VII;緩沖溶液選擇醋酸-醋酸鈉緩沖液、HEPES-Na緩沖液、磷酸鹽緩沖液或檸檬酸鹽緩沖液;蛋白質(zhì)溶液的濃度>0,并且≤50mg/m。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的蛋白質(zhì)結(jié)晶的方法,其特征在于:所述的步驟2)中蛋白質(zhì)結(jié)晶試劑與蛋白質(zhì)溶液的體積之比為0.1-10∶1;分裝于結(jié)晶裝置凹槽內(nèi)的各蛋白質(zhì)結(jié)晶溶液的體積為0.05~4μL。
9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的蛋白質(zhì)結(jié)晶的方法,其特征在于:所述的步驟3)中恒溫選自0-60℃溫度范圍中的任何一種溫度;靜置時(shí)間為24~240小時(shí)。
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