[發明專利]注射用丹參多酚酸中鞣質類物質的檢測方法

有效

• 申請號: 201210132467.2
• 申請日: 2012-04-28
• 公開（公告）號: CN103376300A
• 公開（公告）日: 2013-10-30
• 發明（設計）人: 葉正良;薛靜;李德坤;周大錚
• 申請（專利權）人: 天津天士力之驕藥業有限公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N30/06
• 代理公司: 北京華科聯合專利事務所 11130
• 代理人: 王為

技術領域

本發明涉及一種醫藥檢測領域，具體涉及一種注射用丹參多酚酸中鞣質類物質的排除性檢測方法。

背景技術

鞣質，又稱單寧，是存在于植物體內的一類結構比較復雜的多元酚類化合物。根據鞣質的化學結構可分為兩大類：可水解鞣質和縮合鞣質。可水解鞣質依水解后所得酚酸類的不同，又可分為沒食子酸鞣質和逆沒食子酸鞣質(鞣花酸鞣質)。由于鞣質都是以沒食子酸、鞣花酸和兒茶素為構成單位，通過各種結合方式形成二聚體、三聚體，進而形成低聚體及多聚體。所以通過測定樣品中水解前后沒食子酸、兒茶素、鞣花酸的情況，可以間接反映樣品中鞣質的情況。

鞣質常常被作為雜質除去，因為在中藥制劑中，鞣質不但會對制劑的穩定性和澄明度產生影響，甚至會引起許多嚴重的生理反應。它能與組織蛋白結合形成硬結，導致注射局部組織腫瘤、壞死^[2]；它還會加速紅細胞的凝聚，并能與血紅蛋白形成藥物性沉淀^[3]。近年來中藥注射劑的安全性問題已經引起了人們的普遍關注，由于在丹參的原藥材中存在鞣質類物質，因此，對于注射用丹參多酚酸，鞣質類物質經過制劑工藝后的排除性檢測就顯得分外重要。

丹參多酚酸為一種活血、化瘀、通脈的藥物。其中含有多種酚酸類成分，用于冠心病穩定型心絞痛，分級為I、II級，心絞痛癥狀表現為輕、中度，中醫辨證為心血瘀阻證者，癥見胸痛、胸悶、心悸。

藥理試驗表明，丹參多酚酸對冠狀動脈結扎引起的犬急性心肌梗死有降低心電圖ST段抬高程度，減少梗死面積，降低血清LDH的作用，對ADP誘導的大鼠血小板凝集有一定的抑制作用，對大鼠動靜脈旁路血栓形成有抑制作用。

丹參多酚酸的制備屬于現有技術，其在制備過程中根據不同工藝可能出現雜質鞣質類成分，目前丹參多酚酸去除鞣質的方法主要有明膠沉淀法、堿性醇沉法和聚酰胺吸附法等，但是由于丹參多酚酸樣品中成分較為復雜，分離效果不好，如果操作不當，可能引入鞣質。

目前市場上已經有注射用丹參多酚酸：

【藥品名稱】

通用名稱：注射用丹參多酚酸

漢語拼音：Zhusheyong?Danshen?Duofensuan

【成份】丹參多酚酸；輔料為甘露醇。

【性狀】本品為淺棕色至棕色的粉末或疏松狀物；有引濕性。

【功能主治】活血通絡。用于中風病中經絡(輕中度腦梗死)恢復期瘀血阻絡證，癥見半身不遂，口舌歪斜，舌強言謇，偏身麻木等癥狀。

【制備】取一定量丹參原藥材，加水煎煮三次，合并煎液，冷卻，靜置，離心或過濾去除沉淀，過聚酰胺柱，洗脫液過AB-8型大孔吸附樹脂，用水洗脫，棄去水液，用乙醇進行洗脫，減壓回收乙醇至無醇味，調節pH近中性，最后加入甘露醇，包裝，即得。

為檢測丹參多酚酸中包括注射用丹參多酚酸中的鞣質成分，本發明提供一種丹參多酚酸樣品中鞣質的檢測方法，該方法可對鞣質類三種物質同時進行檢測，方便了操作。

發明內容

本發明提供一種丹參多酚酸中鞣質類物質的檢測方法，其特征在于，步驟如下：

步驟1，取沒食子酸、兒茶素、鞣花酸對照品適量，分別制成相應的對照品溶液；

步驟2，取丹參多酚酸溶于丙酮，得水解前未水解樣品溶液；

步驟3，取丹參多酚酸溶于丙酮，加酸水解，得水解樣品溶液；

步驟4，采用C₁₈色譜柱，流動相甲醇-磷酸水溶液等度洗脫，檢測器為紫外檢測器，測定未水解樣品溶液、水解樣品溶液及對照品中的沒食子酸；

步驟5，采用C₁₈色譜柱，流動相甲醇-磷酸水溶液梯度洗脫，檢測器為紫外檢測器測定未水解樣品溶液、水解樣品溶液及對照品中的兒茶素；

步驟6，采用C₁₈色譜柱，流動相乙腈-磷酸水溶液等度洗脫，檢測器為紫外檢測器測定未水解樣品溶液、水解樣品溶液及對照品中的鞣花酸；

步驟7，比較未水解樣品溶液和水解樣品溶液與對照品溶液的色譜圖判斷丹參多酚酸溶液中是否存在鞣質類成分。

其中，

步驟1對照品溶液的制備，方法如下：

分別精密稱取沒食子酸、兒茶素、鞣花酸對照品適量，分別加甲醇制成相應的對照品溶液，得沒食子酸質量濃度為0.5451mg.mL^-1、兒茶素質量濃度為0.5079mg.mL^-1、鞣花酸質量濃度為0.5067mg.mL^-1的對照品溶液。