[發明專利]多態性檢測用探針、多態性檢測方法、藥效判定方法以及多態性檢測用試劑盒有效
| 申請號: | 201210132135.4 | 申請日: | 2012-04-27 |
| 公開(公告)號: | CN102766682A | 公開(公告)日: | 2012-11-07 |
| 發明(設計)人: | 井口亞希 | 申請(專利權)人: | 愛科來株式會社 |
| 主分類號: | C12Q1/68 | 分類號: | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司: | 北京東方億思知識產權代理有限責任公司 11258 | 代理人: | 肖善強 |
| 地址: | 日本*** | 國省代碼: | 日本;JP |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 多態性 檢測 探針 方法 藥效 判定 以及 試劑盒 | ||
1.一種多態性檢測用探針,其為從包括下述P1和P1’的組中選擇的一種熒光標記寡核苷酸,用于檢測ABCC2基因的多態性:
(P1)熒光標記寡核苷酸,其為含有序列編號1所示的序列中的第207位~第217位的堿基的堿基長為11~60的序列,該序列除了與序列編號1中的第217位的堿基對應的堿基為胞嘧啶之外相對于具有與序列編號1相同的堿基的堿基序列具有至少80%以上的同一性,并且與序列編號1所示的序列中的第217位的堿基對應的堿基用熒光染料標記;以及
(P1’)熒光標記寡核苷酸,其為含有序列編號1所示的序列中的第207位~第217位的堿基的堿基長為11~60的序列,該序列除了與序列編號1中的第217位的堿基對應的堿基為胞嘧啶之外與具有和序列編號1相同的堿基的堿基序列的互補鏈在嚴謹條件下雜交,并且與序列編號1所示的序列中的第217位的堿基對應的堿基用熒光染料標記。
2.根據權利要求1所述的多態性檢測用探針,其中,所述多態性檢測用探針是下述P1或下述P1’的所述熒光標記核苷酸,
(P1-1)熒光標記寡核苷酸,其為含有序列編號1所示的序列中的第207位~第217位的堿基的堿基長為11~60的序列,該序列除了與序列編號1的第217位的堿基對應的堿基為胞嘧啶之外相對于具有與序列編號1相同的堿基的堿基序列具有至少80%以上的同一性,并且與序列編號1所示的序列中的第217位的堿基對應的堿基用熒光染料標記,并且該熒光標記寡核苷酸識別序列編號1的第207位的堿基的多態性;或者
(P1’-1)熒光標記寡核苷酸,其為含有序列編號1所示的序列中的第207位~第217位的堿基的堿基長為11~60的序列,該序列除了與序列編號1中的第217位的堿基對應的堿基為胞嘧啶之外與具有和序列編號1相同的堿基的堿基序列的互補鏈在嚴謹條件下雜交,并且與序列編號1所示的序列中的第217位的堿基對應的堿基用熒光染料標記,并且該熒光標記寡核苷酸識別序列編號1的第207位的堿基的多態性。
3.根據權利要求1或2所述的多態性檢測用探針,其中,所述熒光標記寡核苷酸在從3’末端起數第1位~第3位具有用熒光染料標記的第217位的堿基。
4.根據權利要求1至3中任一項所述的多態性檢測用探針,其中,所述熒光標記寡核苷酸在3’末端具有用熒光染料標記的第217位的堿基。
5.根據權利要求1至4中任一項所述的多態性檢測用探針,其中,所述熒光標記寡核苷酸在未與靶標序列雜交時發出熒光,并且在與該靶標序列雜交時熒光強度減少或增加。
6.根據權利要求1至5中任一項所述的多態性檢測用探針,其中,所述熒光標記寡核苷酸在未與靶標序列雜交時發出熒光,并且在與該靶標序列雜交時熒光強度減少。
7.根據權利要求1至6中任一項所述的多態性檢測用探針,其中,所述熒光標記寡核苷酸的堿基長為12~55。
8.根據權利要求1至7中任一項所述的多態性檢測用探針,其中,所述熒光標記寡核苷酸的堿基長為15~45。
9.根據權利要求1至8中任一項所述的多態性檢測用探針,其中,所述熒光標記寡核苷酸的堿基長為18~35。
10.根據權利要求1至9中任一項所述的多態性檢測用探針,其中,所述多態性檢測用探針為用于分析熔解曲線的探針。
11.根據權利要求1至10中任一項所述的多態性檢測用探針,其中,所述多態性檢測用探針具有序列編號4、序列編號5、序列編號6、序列編號7、序列編號8、序列編號9、序列編號10、序列編號11、序列編號12、序列編號13、序列編號14、序列編號15或序列編號16所示的堿基序列。
12.一種多態性檢測方法,其通過使用權利要求1至11中任一項所述的多態性檢測用探針來檢測ABCC2基因的多態性。
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