[發明專利]一種龍腦樟細胞懸浮培養液及懸浮培養方法

無效

• 申請號: 201210132064.8
• 申請日: 2012-04-28
• 公開（公告）號: CN103374544A
• 公開（公告）日: 2013-10-30
• 發明（設計）人: 李惠華;蘇明華;徐劍;劉小英;常強;王偉;何恩銘
• 申請（專利權）人: 福建省亞熱帶植物研究所
• 主分類號: C12N5/02
• 分類號: C12N5/02;C12N5/04
• 代理公司: 廈門市首創君合專利事務所有限公司 35204
• 代理人: 張松亭

1.一種用于龍腦樟細胞懸浮培養的培養液，包括：

MS基本培養基

2，4-D??1.5-2.5mg/L；

6-BA??0.4-0.8mg/L；

LH?100-1000mg/L；

椰汁0-250mg/L；

CH?500-1500mg/L；和

蔗糖2-5％。

2.如權利要求1所述的一種龍腦樟細胞懸浮培養液，其特征在于：MS基本培養基+2mg/L2，4-D+0.6mg/L?6-BA++100mg/L?LH+150mg/L椰汁+500mg/L?CH+3％蔗糖。

3.一種龍腦樟細胞懸浮培養方法，包括如下步驟：

(1)培養獲取龍腦樟愈傷組織；

(2)提供權利要求1或2的龍腦樟細胞懸浮培養液；

(3)愈傷組織在懸浮培養液中進行懸浮培養；

(4)收獲細胞，提取右旋龍腦。

4.如權利要求3所述的一種龍腦樟細胞懸浮培養方法，其特征在于：步驟(3)的培養包括初代培養和繼代培養，培養的光照強度為0-3000Lux；光照采用白光、紅光或藍光；光照方式采用連續光照方式。

5.如權利要求3所述的一種龍腦樟細胞懸浮培養方法，其特征在于：步驟(3)的接種量為40-60g/L。

6.如權利要求3所述的一種龍腦樟細胞懸浮培養方法，其特征在于：培養18-24天后收獲細胞，提取右旋龍腦。

7.如權利要求3所述的一種龍腦樟細胞懸浮培養方法，其特征在于：步驟(4)收獲細胞的前3天在16℃條件下培養3天。

8.如權利要求3所述的一種龍腦樟細胞懸浮培養方法，其特征在于：步驟(3)搖床轉速為90-130r/min。

9.一種龍腦樟細胞懸浮培養方法，其特征在于：細胞懸浮培養基配方為：MS基本培養基+2mg/L?2，4-D+0.6mg/L?6-BA+500mg/L?LH+500mg/L?CH+150ml/L椰汁+3％蔗糖，pH值為5.8；外界調控條件為：光照強度為2000Lux的白光連續照射，培養5天后置于16℃低溫環境下處理3天，采用250ml的三角瓶裝液80ml，接種量為40g/L·FW，搖床轉速為110r/min，采用透氣膜封口，培養21天收獲。