[發明專利]一種犬細小病毒蜂膠滅活疫苗及其制備方法無效
| 申請號: | 201210130887.7 | 申請日: | 2012-05-01 |
| 公開(公告)號: | CN102657860A | 公開(公告)日: | 2012-09-12 |
| 發明(設計)人: | 單虎;楊瑞梅;韓先杰;黃娟;秦曉冰;張傳美 | 申請(專利權)人: | 青島農業大學 |
| 主分類號: | A61K39/23 | 分類號: | A61K39/23;A61K39/39;A61P31/20;C12N7/00;C12N7/02 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 266109 山東省青島市城*** | 國省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 細小 病毒 蜂膠 疫苗 及其 制備 方法 | ||
1.一種犬細小病毒蜂膠滅活疫苗,其特征在于:犬細小病毒株在F81細胞上進行病毒繁殖,經過收獲、滅活,并以蜂膠作為佐劑混合制成滅活苗。
2.權利要求1所述的滅活疫苗的制備方法,主要包括如下步驟:
1)細小病毒滅活原液的制備;
2)蜂膠溶液的制備;
3)成品疫苗制備:按每ml疫苗含蜂膠干物質含量為8~15mg標準添加蜂膠溶液攪拌15~20分鐘,使其充分混合乳化。
3.根據權利要求2所述的制備方法,其特征在于,所述的犬細小病毒滅活原液的制備步驟包括:將生長良好的F81細胞按常規方法傳代,待細胞長成80%單層后,傾去生長液,換以含1%毒種的維持液(含2%新生牛血清的MEM),置36℃繼續培養,轉瓶轉速為8~l0r/h;接種后,每日觀察細胞病變,當細胞病變(CPE)達80%左右時即可收獲,凍融1次,置-15℃以下凍結保存,待檢備用;按病毒液總量的0.2%加入甲醛溶液,充分混勻,置36℃下滅活,待溫度升至36℃開始計時,180轉/分鐘的搖床中不間斷搖動,滅活48小時。
4.根據權利要求2所述的制備方法,其特征在于,蜂膠液制備由以下步驟完成:選取已知純度的蜂膠,經破碎后過篩,溶于95%的乙醇溶液,再根據要求配成適當濃度的溶液于4℃下保存備用。
5.根據權利要求2-3任一項所述的制備方法,其特征在于,成品疫苗為黃褐色混懸液,密封保存于4-8℃中。
6.權利要求1所述的犬細小病毒蜂膠滅活疫苗的用途,主要是用于犬細小病毒病的免疫。
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