[發(fā)明專利]制備多糖衍生物的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210129838.1
• 申請日: 2007-04-27
• 公開（公告）號: CN102702374A
• 公開（公告）日: 2012-10-03
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 安田洋祐
• 申請（專利權(quán)）人: 生化學(xué)工業(yè)株式會社
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;C08B37/08;A61K31/196;A61K31/216;A61K47/48
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 柯珂;林森

本申請是中國專利申請200780015807.0的分案申請。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及制備多糖衍生物的方法。

背景技術(shù)

按照多糖的構(gòu)成單糖的類型，存在各種不同的多糖。多糖具有不同的分子量、特性和生理功能，并且是深入研究的時興目標(biāo)。

正如本領(lǐng)域已知的那樣，具有能夠與羧基縮合的官能團(tuán)的化合物與透明質(zhì)酸的羧基，(認(rèn)為透明質(zhì)酸是高分子量多糖)的偶合，可以降低所得到透明質(zhì)酸衍生物的親水性，并且引起溶解度小或甚至不溶解的問題。

使羧基-可連接的親核官能團(tuán)與透明質(zhì)酸的羧基偶合的一個傳統(tǒng)已知技術(shù)是使用水溶性的碳二亞胺(WSC)，以使透明質(zhì)酸與氨基在含水溶劑中反應(yīng)(JP?2004-018750和WO2005/085294)。下文將該技術(shù)稱為WSC方法。通過WSC方法獲得的透明質(zhì)酸衍生物具有溶解度小或不溶解的問題。按照J(rèn)P?2004-018750中的說明，當(dāng)透明質(zhì)酸的每個雙糖單位引進(jìn)化合物比率(取代度)不小于0.05％時，分離的透明質(zhì)酸衍生物不溶于中性含水溶劑。當(dāng)取代度不小于5％時，分離的透明質(zhì)酸衍生物不溶于含水溶劑。

對于這種不溶解的問題，JP?2004-018750中推薦的制備方法是，透明質(zhì)酸的縮合反應(yīng)之后，向反應(yīng)溶液中添加堿。這種堿處理使WSC方法制備的化合物能夠溶于中性含水溶劑。WO2005/085294也采取了JP?2004-018750的這種堿處理步驟，從而制備所得到透明質(zhì)酸衍生物的中性水溶液。換句話說，JP?2004-018750和WO2005/085294采取了兩步制備方法：包括WSC方法的縮合反應(yīng)步驟，和堿處理步驟，從而制備可溶于含水溶劑的透明質(zhì)酸衍生物。

如JP?2004-018750所述，預(yù)期通過常規(guī)WSC方法制備的透明質(zhì)酸衍生物在其高級結(jié)構(gòu)方面具有變化，這可以以在中性含水溶劑中不溶解現(xiàn)象的形式觀察到。WSC方法的縮合條件導(dǎo)致透明質(zhì)酸衍生物不溶于中性含水溶劑。WSC方法之后進(jìn)行堿處理，如JP?2004-018750所述，可以恢復(fù)透明質(zhì)酸衍生物的溶解性。水溶性的恢復(fù)是由于通過WSC方法改變的高級結(jié)構(gòu)的進(jìn)一步改變或恢復(fù)。

JP?2004-018750所描述的堿加入步驟(堿處理)，可以使縮合反應(yīng)期間已經(jīng)改變的高級結(jié)構(gòu)得到進(jìn)一步改變或恢復(fù)，從而恢復(fù)曾經(jīng)失去的、對含水溶劑的高親合性。

可商業(yè)購買的縮合劑4-(4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪-2-基)-4-甲基嗎啉氯化物(DMT-MM)可以使羧基和羧基-可連接的親核官能團(tuán)縮合，并且通過低分子物質(zhì)的縮合而主要用于合成酰胺化合物。按照Tetrahedron?55(1999)13159，DMT-MM在含水溶劑中活化羧基，并且?guī)椭c氨基高速形成酰胺鍵。JP?2005-281372描述了DMT-MM在羧基引進(jìn)的環(huán)糊精衍生物的羧基和殼聚糖的氨基之間形成酰胺鍵的應(yīng)用。然而，JP?2005-281372的這種制備方法的目的在于得到不能溶解的衍生物。為了制備水溶性的衍生物，DMT-MM應(yīng)用于高分子量多糖(例如透明質(zhì)酸)的羧基與有機(jī)化合物羧基-可連接的官能團(tuán)的縮合反應(yīng)一直沒有報道。對于描述所得到衍生物水溶液的特性或所得到衍生物的高級結(jié)構(gòu)的變化，也沒有報道。

本發(fā)明公開內(nèi)容

用于縮合反應(yīng)的傳統(tǒng)水溶性縮合劑(水溶性的碳二亞胺)，已經(jīng)用于在多糖的羧基和有機(jī)化合物的可以與羧基縮合的官能團(tuán)之間形成化學(xué)鍵。然而，所制備的多糖衍生物不能均勻地溶于中性含水溶劑中。為了提高產(chǎn)物的溶解性，縮合反應(yīng)之后，需要向反應(yīng)溶液中加入堿的額外步驟。

還有很高的開發(fā)簡單方法的需求，要求這種方法通過具有羧基的多糖與具有能夠與羧基縮合的官能團(tuán)的有機(jī)化合物進(jìn)行偶合反應(yīng)，能夠制備高度可溶性產(chǎn)物。

如上所述，通過透明質(zhì)酸或具有羧基的其它多糖，和具有能夠與羧基縮合的官能團(tuán)的有機(jī)化合物進(jìn)行反應(yīng)所制備的現(xiàn)有技術(shù)的多糖衍生物，在它們的高級結(jié)構(gòu)方面具有顯著的變化，并且在中性含水溶劑中不容易溶解。

為了解決現(xiàn)有技術(shù)的這種問題，并且為了設(shè)計制備多糖衍生物的簡單和有效的方法，本發(fā)明人進(jìn)行了深入的研究。深入研究的結(jié)果是，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，使用特定縮合劑來代替?zhèn)鹘y(tǒng)上使用的縮合劑WSC，可以容易且有效地獲得有用的多糖衍生物，其在含水溶劑中具有良好的溶解性，由此完成了本發(fā)明。

因此，本發(fā)明涉及制備高分子量多糖衍生物的簡單和有效的方法。