[發(fā)明專(zhuān)利]一種制備磷脂酰絲氨酸的方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210128408.8
• 申請(qǐng)日: 2012-04-28
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102676600A
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-09-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 段章群;王瑛瑤;馬榕;胡飛;欒霞;杜傳林
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 國(guó)家糧食局科學(xué)研究院
• 主分類(lèi)號(hào): C12P13/06
• 分類(lèi)號(hào): C12P13/06
• 代理公司: 北京正理專(zhuān)利代理有限公司 11257
• 代理人: 趙曉丹

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種制備磷脂酰絲氨酸的方法。?

背景技術(shù)

磷脂是一類(lèi)含磷酸根脂質(zhì)的總稱(chēng)，主要包括磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、磷脂酰絲氨酸、磷脂酸以及神經(jīng)鞘磷脂等。其中，磷脂酰絲氨酸（Phosphatidylserine,?PS）是一種重要的稀有磷脂，可影響腦內(nèi)化學(xué)訊息的傳遞、并幫助腦細(xì)胞儲(chǔ)存和讀取資料，是維持大腦正常記憶力、反應(yīng)和健康情緒的重要營(yíng)養(yǎng)元素，被稱(chēng)為“大腦維生素”。其結(jié)構(gòu)式如所示：以甘油為主要骨架，1、2號(hào)碳原子連接脂肪酸；3號(hào)碳原子連接一個(gè)帶絲氨酸的磷脂基團(tuán)。?

磷脂酰絲氨酸?

近年來(lái)的研究表明，PS具有預(yù)防老年癡呆癥、改善記憶力、集中注意力、緩解抑郁、減少壓力激素分泌、治療兒童多動(dòng)癥等功能。PS于2007年通過(guò)了美國(guó)FDA認(rèn)證，也是我國(guó)衛(wèi)生部2010年第15號(hào)公告公布的一種新資源食品。

然而，PS不能由人體自身完全合成。目前獲得PS的方法主要是提取法和酶轉(zhuǎn)化法。提取源以動(dòng)物的大腦和內(nèi)臟為主，專(zhuān)利CN1583766和CN1649988分別公布了從動(dòng)物腦和魚(yú)內(nèi)臟中提取PS的方法。但是，由于量的限制，依賴(lài)動(dòng)物大腦和內(nèi)臟工業(yè)化生產(chǎn)PS是不適宜的，此外，動(dòng)物的傳染?。ㄈ绡偱２。┦固崛》óa(chǎn)品的安全性遭到質(zhì)疑，所以提取法已處于淘汰的邊緣。?

目前，PS的制備主要是通過(guò)酶轉(zhuǎn)化法實(shí)現(xiàn)，即磷脂與L-絲氨酸在磷脂酶D的催化下、發(fā)生轉(zhuǎn)磷脂?；磻?yīng)生成PS。該反應(yīng)通常是在含有磷脂的有機(jī)相（乙酸乙酯、乙醚、氯仿等）與含有L-絲氨酸的水相組成的液液雙相體系中進(jìn)行。由于PS是供食用的，其生產(chǎn)過(guò)程應(yīng)避免對(duì)人體有害溶劑的使用，為此，專(zhuān)利JP2002051794和DE102004002053公布了純水體系中制備PS的工藝，借助于特殊均質(zhì)化設(shè)備，整個(gè)反應(yīng)體系呈均質(zhì)膠狀。為了減少設(shè)備投入，專(zhuān)利CN101230365加大了水的用量（最高可達(dá)反應(yīng)物的10倍），用普通的攪拌設(shè)備即可使反應(yīng)體系呈均質(zhì)膠狀。但是，這些工藝中大量水的存在，促使底物磷脂和產(chǎn)物PS發(fā)生水解反應(yīng)生成副產(chǎn)物磷脂酸（PA），比如，底物磷脂的轉(zhuǎn)化率雖然最高可達(dá)94%、但轉(zhuǎn)化成PS的底物磷脂只有54%、而轉(zhuǎn)化成副產(chǎn)物PA的底物磷脂高達(dá)40%，反應(yīng)效率降低的同時(shí)也增加了產(chǎn)物分離純化難度。專(zhuān)利CN101157946公布了亞臨界流體中酶催化制備PS的工藝，由于磷脂在該介質(zhì)中的溶解度有限（80?mg/500?mL），亞臨界裝置結(jié)構(gòu)復(fù)雜、制造成本高、且局限于某一種亞臨界流體，使得該工藝的應(yīng)用受到很大局限。?

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種制備磷脂酰絲氨酸的方法。該方法是在均相體系中完成的轉(zhuǎn)磷脂?；磻?yīng)，克服了現(xiàn)有技術(shù)存在的副產(chǎn)物磷脂酸較多、酶催化反應(yīng)效率低的問(wèn)題。?

為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是：?

本發(fā)明提供了一種制備磷脂酰絲氨酸的方法，該方法是將磷脂和L-絲氨酸在磷脂酶D的作用下進(jìn)行轉(zhuǎn)磷脂?；磻?yīng)，生成磷脂酰絲氨酸，與現(xiàn)有技術(shù)中公開(kāi)的方法相比，本發(fā)明的特點(diǎn)就是所述轉(zhuǎn)磷脂?；磻?yīng)是在均相介質(zhì)體系中進(jìn)行的，其中，所述均相介質(zhì)為γ-戊內(nèi)酯、2-甲基四氫呋喃或其混合物。在該均相反應(yīng)體系中，不產(chǎn)生副產(chǎn)物磷脂酸，酶促轉(zhuǎn)化效率顯著提高，產(chǎn)品質(zhì)量好，工藝綠色安全環(huán)保，磷脂酰絲氨酸的產(chǎn)率達(dá)到80%~98%。

本發(fā)明所述的磷脂來(lái)源于植物、動(dòng)物、微生物，優(yōu)選為大豆磷脂、蛋黃磷脂、魷魚(yú)磷脂，更優(yōu)選為從上述磷脂中分級(jí)濃縮的磷脂酰膽堿（PC）、磷脂酰乙醇胺（PE）、磷脂酰肌醇（PI）中的一種或者幾種。?

本發(fā)明所述的磷脂酶D來(lái)源于植物、動(dòng)物和微生物，其中，植物包括胡蘿卜、白菜、菠菜、甜菜、花椰菜、黃瓜、番茄、甘藍(lán)、棉籽、水稻、大豆、玉米、蓖麻籽、油菜、花生、草莓、葡萄、甜瓜、擬南芥、煙草、海藻等；動(dòng)物包括鼠、牛、養(yǎng)、豬等的大腦、肝臟及胰臟；微生物包括鏈霉菌（Streptomycete）、棒狀桿菌（Corynebacteria）、大腸桿菌（Escherichia）、假單胞菌（Pseudomonas）、沙門(mén)氏桿菌（Salmonella）、酵母菌（Yeast）等。優(yōu)選為微生物來(lái)源的磷脂酶D，更優(yōu)選為來(lái)源于鏈霉菌（Streptomycete）的磷脂酶D。這些不同的磷脂酶D可以單獨(dú)使用，也可以組合使用。?