[發(fā)明專利]一種快速定量檢測土壤中有機磷農(nóng)藥殘留的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210126308.1
• 申請日: 2012-04-27
• 公開（公告）號: CN102628810A
• 公開（公告）日: 2012-08-08
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王繼雯;慕蘭;楊文玲;甄靜;謝寶恩;劉瑩瑩;李冠杰;周伏忠;陳國參
• 申請（專利權(quán)）人: 河南省科學院生物研究所有限責任公司
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及藥物檢測技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種快速定量檢測土壤中的有機磷農(nóng)藥殘留量的方法。

背景技術(shù)

有機磷農(nóng)藥的大量使用造成了嚴重的環(huán)境污染，也危及到人類的健康。發(fā)展有機磷農(nóng)藥快速檢測方法越來越受到人們的重視，目前檢測有機磷農(nóng)藥的分析方法主要有波譜法、色譜法和酶抑制法。波譜法靈敏度不高，一般只能作為定性的鑒別方法用于粗選；色譜法是目前檢測有機磷農(nóng)藥的最主要檢測方法，根據(jù)檢測過程中的物理化學特性又可分為薄層色譜法、氣相色譜法和高效液相色譜法三類。其中氣相色譜法是進入20世紀50年代以后，在柱層析的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新型的儀器分析方法，已成為目前典型的、應(yīng)用最廣的儀器分析方法。薄層色譜法受分析的靈敏度、定量困難的制約。液相色譜法與氣相色譜法相比，雖說不受樣品的揮發(fā)度和熱穩(wěn)定性的限制，非常適合于大分子、不穩(wěn)定的化合物的分析，但在實際應(yīng)用中，凡是能用氣相色譜法分析的樣品一般不用液相色譜法，因為氣相色譜更快，更靈敏，更方便，并且耗費更低。所以氣相色譜法在分析有機磷農(nóng)藥時，無論在分析速度、靈敏度還是分離效率上，都呈現(xiàn)出明顯的優(yōu)越性。該方法是利用經(jīng)提取、純化、濃縮后的有機磷農(nóng)藥注入氣相色譜柱，程序升溫氣化后，不同的有機磷農(nóng)藥在固定相中分離，經(jīng)不同的檢測器檢測掃描繪出氣相色譜圖，通過保留時間來定性，通過峰高或峰面積與標準曲線對照來定量。但氣相色譜儀使用條件要求高，對使用環(huán)境和操作條件要求嚴格，使用人員要經(jīng)過專門的培訓，操作繁瑣，時間較長。因此，在一般實驗室不能實現(xiàn)快速定量檢測有機磷農(nóng)藥。

酶抑制法是利用有機磷農(nóng)藥的毒理特性建立的一種快速檢測方法。由于有機磷農(nóng)藥可以抑制膽堿酯酶的活性。在無有機磷農(nóng)藥存在時，乙酰膽堿或丁酰膽堿在膽堿酯酶作用下可以產(chǎn)生膽堿和乙酸或丁酸；當有機磷農(nóng)藥存在時，膽堿酯酶的活性受到抑制，作為其分解產(chǎn)物的乙酸或丁酸也相應(yīng)減少。利用上述反應(yīng)特性，根據(jù)指示劑顏色或反應(yīng)液pH值的變化，就可以達到檢測有機磷農(nóng)藥的目的。AOAC在1964年最早公布了該方法檢測有機磷農(nóng)藥，美國的中西部研究院(MidwestResearch?Institute)于1985年報道的農(nóng)藥檢測酶片(Enzyme?Ticket)，可測出水中0.1～10ng/L有機磷(OPS)或氨基甲酸酯類農(nóng)藥，我國農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護科研監(jiān)測所李治祥等1989年也做了類似報道。2002年新頒布的中華人民共和國國家標準GB/T18630-2002還將酶抑制法作為蔬菜中有機磷及氨基甲酸酯農(nóng)藥殘留量的簡易檢驗方法。目前應(yīng)用酶抑制法來檢測有機磷農(nóng)藥的方法主要有膜電極法和紙片法。具體就是將乙酰膽堿(AchE)吸附在載體(電極或紙片)上，當檢測含有有機磷農(nóng)藥的樣品時，乙酰膽堿(AchE)活性被抑制，從電極的讀數(shù)指示變化或紙片的顏色變化來定性檢測有機磷農(nóng)藥，也可與標準有機磷農(nóng)藥比較來定量。EWilkins等研究了利用乙酰膽堿酯酶電流傳感器對有機磷農(nóng)藥敵敵畏、倍硫磷、二嗪農(nóng)等在乙醇溶劑中的定量測定方法。酶抑制法最大的優(yōu)點是操作簡便，速度快，不需昂貴的儀器，特別適合現(xiàn)場檢測以及大批樣品的篩選檢測，易于推廣普及；但是靈敏度比儀器法要差一些，重復性、回收率還有待提高。

據(jù)資料顯示，目前，有機磷農(nóng)藥快速檢測方法主要是酶抑制法，并且該法也主要是用于各種蔬菜、水果和食品類有機磷農(nóng)藥殘留的定性或半定量檢測，而對于土壤中有機磷農(nóng)藥殘留的快速定量檢測方法幾乎沒有。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供一種能夠快速且定量檢測土壤中的有機磷農(nóng)藥殘留量的方法。

為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供以下技術(shù)方案：

一種快速定量檢測土壤中有機磷農(nóng)藥殘留的方法，其包括步驟：

A、土壤樣品的處理，包括：(1)有機磷農(nóng)藥污染土壤樣品的處理：將含有機磷農(nóng)藥的風干土壤樣品充分研磨后，過100目篩，取一支干凈的試管，準確稱取0.50g土樣，加入2.5mL?pH8.0磷酸緩沖液在混合儀上充分混勻3-5min，為待檢土壤樣品懸液；(2)空白土壤樣品的處理：將不含農(nóng)藥的土樣風干后，充分研磨后，過100目篩，準確稱取0.50g空白土樣，加入2.5mL?pH8.0磷酸緩沖液在混合儀上充分混勻3-5min，為待檢空白土樣懸液；