[發(fā)明專利]一種生物有機(jī)肥發(fā)酵菌種S4的制備方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210125426.0
• 申請日: 2010-10-27
• 公開（公告）號: CN102943051A
• 公開（公告）日: 2013-02-27
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 高勇;陳家任;楊樹;祖秉橋;李錫宏
• 申請（專利權(quán)）人: 中國煙草總公司湖北省公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C05F11/08;C12R1/07
• 代理公司: 武漢金堂專利事務(wù)所 42212
• 代理人: 丁齊旭

1.一種生物有機(jī)肥發(fā)酵菌種解淀粉芽孢桿菌(Bacillus?amyloliquefaciens?)S₄，其保藏編號為：CCTCC?No.M?2010249。

2.一種生物有機(jī)肥發(fā)酵菌種的制備方法，其特征在于制備步驟為：

1）、種子培養(yǎng)，以權(quán)利要求1、權(quán)利要求2所述的菌種短桿菌S₄在種子三角瓶中進(jìn)行種子培養(yǎng)，在種子三角瓶內(nèi)加入培養(yǎng)基MD，種子培養(yǎng)條件：培養(yǎng)基滅菌后接入斜面母種，在28～30℃下，振蕩培養(yǎng)16～22小時，所述培養(yǎng)基其組成質(zhì)量百分?jǐn)?shù)比：葡萄糖0.7～1.0%，蛋白胨0.6～0.8%，酵母膏0.3～0.5%，Na?Cl??0.2～0.4%，KH₂PO_4??0～0.2%其余為水，將PH調(diào)至6.7～8.0；

2）、擴(kuò)繁培養(yǎng)，在發(fā)酵罐中加入培養(yǎng)基MD，滅菌后按照發(fā)酵罐培養(yǎng)基MD的3～8%體積比接入上述培養(yǎng)物混合后作種子，擴(kuò)繁培養(yǎng)條件：罐壓為0.4～0.6Mpa，罐溫為28～30℃，空氣流量為0.3～0.6(v/v/min)，攪拌器轉(zhuǎn)速為200rpm，擴(kuò)繁培養(yǎng)18～24小時,?當(dāng)培養(yǎng)液的OD值為OD600nm下降0.02時終止發(fā)酵；

3)、產(chǎn)品培養(yǎng)，在大型發(fā)酵罐中加入培養(yǎng)基MD，滅菌后按照發(fā)酵罐培養(yǎng)基的3～8%體積比接入擴(kuò)繁培養(yǎng)的培養(yǎng)物作液體種子，產(chǎn)品培養(yǎng)條件：罐壓為0.4～0.6Mpa，罐溫為28～30℃，空氣流量為0.3～0.6(v/v/min)，攪拌器轉(zhuǎn)速為140～200rpm，產(chǎn)品培養(yǎng)18～24小時；當(dāng)培養(yǎng)液的OD值為OD600mn下降0.02時終止發(fā)酵；

4）、將上述發(fā)酵培養(yǎng)物經(jīng)膜濾濃縮1～8倍，檢測得液態(tài)菌劑；或?qū)⑸鲜霭l(fā)酵培養(yǎng)物經(jīng)膜濾濃縮1～8倍后，加入分散劑，進(jìn)一步干燥得固態(tài)菌劑產(chǎn)品。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的一種生物有機(jī)肥發(fā)酵菌種的使用方法，其特征是能夠單獨(dú)使用，或者與短桿菌D₁菌聯(lián)合使用，聯(lián)合使用時的比例為：短桿菌D₁菌：解淀粉芽孢桿菌S₄菌=1～4:1。