[發明專利]一種參與丁醇生成的醇脫氫酶及其應用

無效

• 申請號: 201210122975.2
• 申請日: 2012-04-24
• 公開（公告）號: CN103374589A
• 公開（公告）日: 2013-10-30
• 發明（設計）人: 趙蒙;蔣宇;楊晟;姜衛紅
• 申請（專利權）人: 中國科學院上海生命科學研究院
• 主分類號: C12N15/74
• 分類號: C12N15/74;C12N1/21;C12P7/16;C12R1/145
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 祝蓮君;雷芳

1.一種分離的CA_C3375醇脫氫酶或其編碼基因的用途，其特征在于，它被用于調節丙酮丁醇梭菌產生溶劑的能力。

2.如權利要求1所述的CA_C3375醇脫氫酶，其特征在于，所述的溶劑選自下組：乙醇，丙酮，丁醇，或其組合。

3.如權利要求1所述的CA_C3375醇脫氫酶，其特征在于，所述的CA_C3375醇脫氫酶選自下組：

(i)具有SEQ?ID?NO.：29所示氨基酸序列的多肽；

(ii)將SEQ?ID?NO.：29所示氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代、缺失或添加而形成的、由(i)衍生的多肽；

(iii)氨基酸序列與SEQ?ID?NO.：29所示氨基酸序列的同源性≥90％(較佳地≥95％，更佳地≥97％，更佳地≥99％)、由(1)衍生的多肽。

4.如權利要求1所述的CA_C3375醇脫氫酶，其特征在于，所述CA_C3375醇脫氫酶的編碼基因是選自下組的一種或多種：

(1)編碼如SEQ?ID?NO.：29所述多肽的多核苷酸；

(2)序列如SEQ?ID?NO.：1所示的多核苷酸；

(3)序列與SEQ?ID?NO.：1所示序列的同源性≥95％(較佳地≥97％，更佳的≥99％)的多核苷酸；

(4)與(1)-(3)任一所述的多核苷酸序列互補的多核苷酸。

5.一種提高丙酮丁醇梭菌產生丁醇能力的方法，其特征在于，包括步驟：提高丙酮丁醇梭菌中CA_C3375醇脫氫酶基因的表達水平，或提高丙酮丁醇梭菌中CA_C3375醇脫氫酶的活性。

6.如權利要求5所述的方法，其特征在于，所述的提高是指，與野生型丙酮丁醇梭菌相比，CA_C3375醇脫氫酶基因的mRNA表達水平提高10％以上，或CA_C3375醇脫氫酶的表達或活性上升10％以上；

較佳地，所述的提高通過選自下組的一種或多種方式實現：導入額外的CA_C3375醇脫氫酶、引入提高CA_C3375醇脫氫酶的表達或活力的突變、或引入瞬時表達CA_C3375醇脫氫酶的表達載體。

7.一種丙酮丁醇梭菌，其特征在于，所述丙酮丁醇梭菌中CA_C3375醇脫氫酶基因的表達水平或CA_C3375醇脫氫酶的活性提高。

8.如權利要求7所述的丙酮丁醇梭菌，其特征在于，所述的提高是指，與野生型丙酮丁醇梭菌相比，CA_C3375醇脫氫酶基因的mRNA表達水平提高10-100％，或CA_C3375醇脫氫酶的表達或活性提高10-100％；

較佳地，所述的提高通過選自下組的一種或多種方式實現：導入額外的CA_C3375醇脫氫酶、引入提高CA_C3375醇脫氫酶的表達或活力的突變、或引入瞬時表達CA_C3375醇脫氫酶的表達載體。

9.權利要求7所述丙酮丁醇梭菌的用途，其特征在于，它被用于生產溶劑。

10.一種生產丁醇的方法，其特征在于，包括步驟：

(A)在適合的條件下，培養權利要求7所述的丙酮丁醇梭菌，獲得含有丁醇的培養物；和

(B)從所述的培養物中分離和/或純化丁醇。