[發明專利]一種對抗體具有廣譜吸附能力的融合蛋白制備方法及應用

有效

• 申請號: 201210118134.4
• 申請日: 2012-04-21
• 公開（公告）號: CN102676562A
• 公開（公告）日: 2012-09-19
• 發明（設計）人: 賈凌云;張嘉玉;任軍;徐麗;謝健
• 申請（專利權）人: 大連理工大學
• 主分類號: C12N15/62
• 分類號: C12N15/62;C12N15/63;C12N1/21;C07K19/00;C07K1/22;C07K1/18;B01J20/26;B01D15/08;C12R1/19
• 代理公司: 大連東方專利代理有限責任公司 21212
• 代理人: 賈漢生

1.一種融合蛋白AG基因，其特征在于：其核苷酸序列為SEQ?ID?NO：5所示。

2.如權利要求1所述的融合蛋白AG基因所編碼的蛋白質，其氨基酸序列為SEQ?IDNO：6所示。

3.一種重組表達融合蛋白AG基因的質粒，其特征在于：以pET-23a為表達載體，插入權利要求1所述的融合蛋白AG基因得到的重組表達質粒。

4.一種重組表達融合蛋白AG的重組菌株，其特征在于：由權利要求3所述的重組表達質粒轉化大腸桿菌BL21(DE3)得到的重組菌株。

5.利用權利要求4所述的重組菌株表達融合蛋白AG的方法，其特征在于：包括如下步驟：利用表達載體pET-23a構建含有權利要求1所述融合蛋白AG基因的重組表達質粒；用該質粒轉化大腸桿菌BL21(DE3)宿主細胞，經過培養、篩選得到能夠表達融合蛋白AG的重組菌株；培養該菌株，IPTG誘導蛋白表達；分離并純化所表達的蛋白。

6.根據權利要求5所述的重組菌株表達融合蛋白AG的方法，其特征在于：所述的純化方法為DEAE弱陰離子交換層析法處理后，再進行IgG-Fc親和層析。

7.利用權利要求5所述的方法制備的融合蛋白AG可應用在抗體純化、制備吸附介質、制備血液凈化吸附劑等方面。

8.一種融合蛋白AG吸附劑，其特征在于：利用權利要求5所述的方法制備的融合蛋白AG，將其作為配基連接到固相載體基質Sepharose?CL?4B上制成吸附劑。

9.根據權利要求8所述的吸附劑，其特征在于：其中，制備吸附劑的配基鍵合量為2～10mg/mL膠。