[發(fā)明專利]一種忍冬藤多糖的制備方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210117673.6
• 申請日: 2012-04-20
• 公開（公告）號: CN102603914A
• 公開（公告）日: 2012-07-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉富崗;楊云;衛(wèi)冰;許閩
• 申請（專利權(quán)）人: 河南中醫(yī)學(xué)院
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;A61P39/00;A61P37/02;A61P39/06
• 代理公司: 鄭州天陽專利事務(wù)所(普通合伙) 41113
• 代理人: 聶孟民

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及醫(yī)藥領(lǐng)域，特別是一種忍冬藤多糖的制備方法。

背景技術(shù)

中藥忍冬藤(Casulis??Lonicerae)為忍冬科植物忍冬Lonicera?japonica的干燥莖枝，資源豐富，價(jià)廉易得。中醫(yī)用于治療溫病發(fā)熱，熱毒血痢，癰腫瘡瘍，風(fēng)濕熱痹，關(guān)節(jié)紅腫熱痛。具有清熱解毒，疏風(fēng)通絡(luò)的功能。目前對忍冬藤的研究僅限于有機(jī)酸類、黃酮類、鞣質(zhì)、生物堿等化合物的研究，而對忍冬藤多糖的研究在國內(nèi)外均無人涉足，目前已有研究報(bào)道表明，忍冬的花蕾金銀花的多糖具有較好的提高免疫和抗氧化活性，是一種在治療腫瘤及抗衰老方面的潛力藥。作為忍冬藤莖的忍冬藤，其多糖極有可能與金銀花多糖具有相同的功效，因此，如何研制出一種從忍冬藤中提取忍冬藤多糖，且多糖得率高的忍冬藤多糖制備方法為眾所期待。

發(fā)明內(nèi)容

針對上述情況，為克服現(xiàn)有技術(shù)缺陷，本發(fā)明之目的就是提供一種忍冬藤多糖的制備方法，可有效解決忍冬藤多糖的制備問題。

本發(fā)明解決的技術(shù)方案是，包括以下步驟：

（1）將忍冬藤干燥、粉碎過20目篩，得忍冬藤粉末，稱取忍冬藤粉末1~3kg備用；

（2）稱取忍冬藤粉末重量體積0.5%～2.5%的酶，在酶中加入10-20倍酶重量體積的30～60℃的水，溶解，30～60℃水浴活化5～45分鐘，得活化的酶溶液，備用；

（3）將上述稱取的忍冬藤粉末與水以1：10～20的重量體積比混合，40～90℃水浴，浸泡20～120分鐘，冷卻至18～25℃，用鹽酸調(diào)pH至4.0～5.5，搖勻，水浴加熱至40～55℃，加入上述活化的酶溶液，混勻，酶解2～12小時；

（4）將第（3）步所得溶液用80～95℃水浴回流提取2～5次，每次2～5小時，過濾，合并濾液，濃縮至忍冬藤粉末重量體積的1-2倍，再加入乙醇至含醇量達(dá)到80%，靜置12小時，離心去除上清液，得忍冬藤多糖沉淀物；

（5）依次向忍冬藤多糖沉淀物中加入沉淀物重量體積的1-2倍量的無水乙醇、丙酮、乙醚洗滌，離心去除上清液，去除上清液后的沉淀物真空干燥，得忍冬藤多糖；

所述的酶為纖維素酶、果膠酶、木聚糖酶、?-葡聚糖酶、蛋白酶中的一種或兩種以上的混合。

本發(fā)明操作簡單、方便、快速，多糖得率高，初始反應(yīng)物便宜易得，大大減少了制備成本，提取的忍冬多糖純度高，并且保留了較高的生物活性，是忍冬藤多糖制備上的創(chuàng)新，經(jīng)濟(jì)和社會價(jià)值顯著。

具體實(shí)施方式

以下結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明的具體實(shí)施方式作詳細(xì)說明。

實(shí)施例1

（1）將忍冬藤干燥，粉碎過20目篩，得忍冬藤粉末，稱取忍冬藤粉末1kg備用；

（2）稱取5g的纖維素酶，在纖維素酶中加入50ml?32℃溫水，溶解，32℃水浴活化28分鐘，得活化的酶溶液，備用；

（3）將上述稱取的忍冬藤粉末與10000?ml水混合，40℃水浴，浸泡120分鐘，冷卻至18℃，用鹽酸調(diào)pH至5.3，搖勻，水浴加熱至55℃，加入上述活化的酶溶液，混勻，酶解2小時；?

（4）將第（3）步所得溶液用80～95℃水浴回流提取2次，每次2小時，過濾，合并濾液，濃縮至忍冬藤粉末重量體積的2倍，再加入乙醇至含醇量達(dá)到80%，靜置12小時，離心去除上清液，得忍冬藤多糖沉淀物；

（5）依次向忍冬藤多糖沉淀物中加入沉淀物重量體積的1倍量的無水乙醇、丙酮、乙醚洗滌，離心去除上清液，去除上清液后的沉淀物真空干燥，得忍冬藤多糖。

實(shí)施例2

（1）將忍冬藤干燥，粉碎過20目篩，得忍冬藤粉末，稱取忍冬藤粉末2kg備用；

（2）稱取果膠酶30g，在果膠酶中加入450?ml?45℃溫水，溶解，45℃水浴活化20分鐘，得活化的酶溶液，備用；

（3）將上述稱取的忍冬藤粉末加水30000?ml混合，70℃水浴，浸泡50分鐘，冷卻至20℃，用鹽酸調(diào)pH至4，搖勻，水浴加熱至47℃，加入上述活化的酶溶液，混勻，酶解5小時；

（4）將第（3）步所得溶液用95℃水浴回流提取3次，每次5小時，過濾，合并濾液，濃縮至忍冬藤粉末重量體積的1倍，再加入乙醇至含醇量達(dá)到80%，靜置12小時，離心去除上清液，得忍冬藤多糖沉淀物；

（5）依次向忍冬藤多糖沉淀物中加入沉淀物重量體積的1倍量的無水乙醇、丙酮、乙醚洗滌，離心去除上清液，去除上清液后的沉淀物真空干燥，得忍冬藤多糖。

實(shí)施例3