[發明專利]一種忍冬藤多糖的制備方法

無效

• 申請號: 201210117673.6
• 申請日: 2012-04-20
• 公開（公告）號: CN102603914A
• 公開（公告）日: 2012-07-25
• 發明（設計）人: 劉富崗;楊云;衛冰;許閩
• 申請（專利權）人: 河南中醫學院
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;A61P39/00;A61P37/02;A61P39/06
• 代理公司: 鄭州天陽專利事務所(普通合伙) 41113
• 代理人: 聶孟民

1.一種忍冬藤多糖的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）將忍冬藤干燥、粉碎過20目篩，得忍冬藤粉末，稱取忍冬藤粉末1~3kg備用；

（2）稱取忍冬藤粉末重量體積0.5%～2.5%的酶，在酶中加入10-20倍酶重量體積的30～60℃的水，溶解，30～60℃水浴活化5～45分鐘，得活化的酶溶液，備用；

（3）將上述稱取的忍冬藤粉末與水以1：10～20的重量體積比混合，40～90℃水浴，浸泡20～120分鐘，冷卻至18～25℃，用鹽酸調pH至4.0～5.5，搖勻，水浴加熱至40～55℃，加入上述活化的酶溶液，混勻，酶解2～12小時；

（4）將第（3）步所得溶液用80～95℃水浴回流提取2～5次，每次2～5小時，過濾，合并濾液，濃縮至忍冬藤粉末重量體積的1-2倍，再加入乙醇至含醇量達到80%，靜置12小時，離心去除上清液，得忍冬藤多糖沉淀物；

（5）依次向忍冬藤多糖沉淀物中加入沉淀物重量體積的1-2倍量的無水乙醇、丙酮、乙醚洗滌，離心去除上清液，去除上清液后的沉淀物真空干燥，得忍冬藤多糖；

所述的酶為纖維素酶、果膠酶、木聚糖酶、?-葡聚糖酶、蛋白酶中的一種或兩種以上的混合。

2.根據權利要求1所述的忍冬藤多糖的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）將忍冬藤干燥，粉碎過20目篩，得忍冬藤粉末，稱取忍冬藤粉末1kg備用；

（2）稱取5g的纖維素酶，在纖維素酶中加入50ml?32℃溫水，溶解，32℃水浴活化28分鐘，得活化的酶溶液，備用；

（3）將上述稱取的忍冬藤粉末與10000?ml水混合，40℃水浴，浸泡120分鐘，冷卻至18℃，用鹽酸調pH至5.3，搖勻，水浴加熱至55℃，加入上述活化的酶溶液，混勻，酶解2小時；（4）將第（3）步所得溶液用80～95℃水浴回流提取2次，每次2小時，過濾，合并濾液，濃縮至忍冬藤粉末重量體積的2倍，再加入乙醇至含醇量達到80%，靜置12小時，離心去除上清液，得忍冬藤多糖沉淀物；

（5）依次向忍冬藤多糖沉淀物中加入沉淀物重量體積的1倍量的無水乙醇、丙酮、乙醚洗滌，離心去除上清液，去除上清液后的沉淀物真空干燥，得忍冬藤多糖。

3.根據權利要求1所述的忍冬藤多糖的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）將忍冬藤干燥，粉碎過20目篩，得忍冬藤粉末，稱取忍冬藤粉末2kg備用；

（2）稱取果膠酶30g，在果膠酶中加入450?ml?45℃溫水，溶解，45℃水浴活化20分鐘，得活化的酶溶液，備用；

（3）將上述稱取的忍冬藤粉末加水30000?ml混合，70℃水浴，浸泡50分鐘，冷卻至20℃，用鹽酸調pH至4，搖勻，水浴加熱至47℃，加入上述活化的酶溶液，混勻，酶解5小時；

（4）將第（3）步所得溶液用95℃水浴回流提取3次，每次5小時，過濾，合并濾液，濃縮至忍冬藤粉末重量體積的1倍，再加入乙醇至含醇量達到80%，靜置12小時，離心去除上清液，得忍冬藤多糖沉淀物；

（5）依次向忍冬藤多糖沉淀物中加入沉淀物重量體積的1倍量的無水乙醇、丙酮、乙醚洗滌，離心去除上清液，去除上清液后的沉淀物真空干燥，得忍冬藤多糖。

4.根據權利要求1所述的忍冬藤多糖的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）將忍冬藤干燥，粉碎過20目篩，得忍冬藤粉末，稱取忍冬藤粉末3kg備用；

（2）稱取木聚糖酶75g，在木聚糖酶中加入1500?ml?58℃溫水，溶解，58℃水浴活化8分鐘，得活化的酶溶液，備用；

（3）將上述稱取的忍冬藤粉末加水60000?ml混合，80℃水浴，浸泡20分鐘，冷卻至25℃，用鹽酸調pH至4.5，水浴加熱至40℃，加入上述活化的酶溶液，混勻，酶解11小時；

（4）將第（3）步所得溶液用95℃水浴回流提取4次，每次3小時，過濾，合并濾液，濃縮至忍冬藤粉末重量體積的1倍，再加入乙醇至含醇量達到80%，靜置12小時，離心去除上清液，得忍冬藤多糖沉淀物；

（5）依次向忍冬藤多糖沉淀物中加入沉淀物重量體積的1倍量的無水乙醇、丙酮、乙醚洗滌，離心去除上清液，去除上清液后的沉淀物真空干燥，得忍冬藤多糖。