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[發明專利]耐有機溶劑蛋白酶的突變體有效

專利信息
申請號: 201210113983.0 申請日: 2012-04-17
公開(公告)號: CN102660521A 公開(公告)日: 2012-09-12
發明(設計)人: 何冰芳;莊宇;朱富成;吳斌 申請(專利權)人: 南京工業大學
主分類號: C12N9/52 分類號: C12N9/52;C12N15/57;C12N15/63;C12N1/21;C12N1/19;C12N1/15;C12P21/06;C12R1/385
代理公司: 江蘇致邦律師事務所 32230 代理人: 樊文紅
地址: 211816 江蘇省南京市*** 國省代碼: 江蘇;32
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摘要:
搜索關鍵詞: 有機溶劑 蛋白酶 突變體
【權利要求書】:

1.?一種蛋白酶突變體,是通過用另一種氨基酸殘基取代在由SEQ?ID?No:1表示的氨基酸序列的蛋白酶的下述位置、或其相應位置上的氨基酸殘基而獲得的蛋白酶突變體,且所述的氨基酸殘基位置為SEQ?ID?No:1中的:第46位,和/或第224位;其在有機溶劑中穩定性提高。

2.?一種蛋白酶突變體,是通過用另一種氨基酸殘基取代在由SEQ?ID?No:1表示的氨基酸序列表現出至少90%同源性的氨基酸序列的蛋白酶的下述位置、或其相應位置上的氨基酸殘基而獲得的蛋白酶突變體,且所述的氨基酸殘基位置為SEQ?ID?No:1中的:第46位,和/或第224位;其在有機溶劑中穩定性提高。

3.?一種蛋白酶突變體,是通過用另一種氨基酸殘基取代在由SEQ?ID?No:1表示的氨基酸序列表現出至少99%同源性的氨基酸序列的蛋白酶的下述位置、或其相應位置上的氨基酸殘基而獲得的蛋白酶突變體,且所述的氨基酸殘基位置為SEQ?ID?No:1中的:第46位,和/或第224位;其在有機溶劑中穩定性提高。

4.?根據權利要求1至3之一所述的蛋白酶突變體,其特征在于所述的另一種氨基酸殘基選自下述的氨基酸:第46位:酪氨酸;第224位:苯丙氨酸或酪氨酸。

5.?編碼權利要求1至3之一所述的蛋白酶突變體的基因。

6.?包含權利要求5所述基因的重組載體。

7.?包含權利要求6所述重組載體的轉化體。

8.?利用權利要求1至3之一所述的蛋白酶突變體在非水體系中催化小肽合成反應的應用。

9.?根據權利要求8所述的應用,其特征在于:以Cbz-Gly-OH和L-Phe-NH2為底物,本發明所述的蛋白酶突變體溶解在pH8.0的Tris-HCl中,與等體積的有機溶劑混合,在30℃保溫反應。

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