[發明專利]幽門螺旋桿菌毒力蛋白質組的制備方法無效
| 申請號： | 201210113718.2 | 申請日： | 2012-04-18 |
| 公開（公告）號： | CN102643850A | 公開（公告）日： | 2012-08-22 |
| 發明（設計）人： | 金守光;楊洪江 | 申請（專利權）人： | 天津天佛羅生物技術有限公司 |
| 主分類號： | C12N15/70 | 分類號： | C12N15/70;C12N9/80;C07K14/20;C07K1/22;C12R1/19;C12R1/01 |
| 代理公司： | 天津盛理知識產權代理有限公司 12209 | 代理人： | 王來佳 |
| 地址： | 300191 天津市南開區新技*** | 國省代碼： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 幽門 螺旋 桿菌 毒力 蛋白質 制備 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種幽門螺旋桿菌毒力蛋白質組的制備方法，其特征在于：步驟如下：
(1)分別擴增6種毒力蛋白基因，針對6種毒力蛋白設計引物，引物序列見序列1至序列12，引物分別插入限制性內切酶位點；
(2)分別克隆6種毒力蛋白編碼基因；
(3)分別亞克隆6種毒力蛋白編碼基因到表達載體上；
(4)大腸桿菌宿主細胞內分別表達6種毒力蛋白；
(5)純化；
所述6種毒力蛋白為細胞毒素相關蛋白CagA、空泡毒素蛋白VacA、鞭毛蛋白亞基A、鞭毛蛋白亞基B、尿素酶亞基A和尿素酶亞基B。
2.根據權利要求1所述的幽門螺旋桿菌毒力蛋白質組的制備方法，其特征在于：所述步驟(2)的6種毒力蛋白編碼基因分別克隆到TOPO?TAKits試劑盒或T-EASAY試劑盒的質粒載體上。
3.根據權利要求1所述的幽門螺旋桿菌毒力蛋白質組的制備方法，其特征在于：所述步驟(3)的6種毒力蛋白編碼基因分別亞克隆到表達載體pQE30上。
4.根據權利要求1所述的幽門螺旋桿菌毒力蛋白質組的制備方法，其特征在于：所述步驟(5)利用Ni-NTA純化填料制備的層析柱，分離純化這6種重組毒力蛋白。
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