[發明專利]一種用發光細菌對抗生素類物質毒性進行檢測的方法

無效

• 申請號: 201210113701.7
• 申請日: 2012-04-17
• 公開（公告）號: CN102634564A
• 公開（公告）日: 2012-08-15
• 發明（設計）人: 李娟英;王靜;彭自然
• 申請（專利權）人: 上海海洋大學
• 主分類號: C12Q1/18
• 分類號: C12Q1/18
• 代理公司: 上海三和萬國知識產權代理事務所 31230
• 代理人: 陳偉勇

1.一種用發光細菌對抗生素類物質毒性進行檢測的方法，包括如下步驟；

1)配制抗生素母液并將母液稀釋至實驗所需濃度；

2)制備發光細菌凍干粉復蘇液；

3)空白對照制備：對于溶解性的抗生素，將發光細菌復蘇液作為空白對照；對于不溶或微溶性的抗生素，將含有與對應待測樣品具有相同含量二甲基亞砜的復蘇液作為空白對照；

4)待測樣品溶液制備：取不同濃度的待測樣品加入到干凈的測試管中，搖勻；

5)將空白對照和待測樣品相間放置于測試架上；

6)按順序向各個測試管中加入復蘇的發光細菌凍干粉(根據發光量和儀器要求調節加入量)，兩管加入時間相隔15-30s，輕輕振蕩，使之均勻，

7)EC50值的計算：以待測樣品濃度的對數為橫坐標，對應的相對發光率為縱坐標作圖，求得其EC50值，即相對發光率在50％的樣品的濃度；

其特征在于，所述步驟6)的放置后，向各個管中按比例依次加入發光細菌的完全培養基，使抗生素類物質與發光細菌作用時間延長至12-36h后在水質毒性檢測儀測定發光量。

2.根據權利要求1所述的一種用發光細菌對抗生素類物質毒性進行檢測的方法，其特征在于，所述抗生素類物質與發光細菌作用時間延長至24個小時。

3.根據權利要求1所述的發光細菌檢測抗生素類物質毒性的改進方法，其特征在于，抗生素類物質與發光細菌在20-25℃條件下培養。

4.根據權利要求1所述的用發光細菌對抗生素類物質毒性進行檢測的方法，其特征在于，所述抗生素類物質包括青霉素類、頭孢菌素類、氨基糖苷類、大環內酯類、四環素類、氯霉素類、林可酰胺類。

5.根據權利要求1所述的用發光細菌對抗生素類物質毒性進行檢測的方法，其特征在于，所述抗生素類物質為四環素類和磺胺類抗生素。

6.根據權利要求5所述的用發光細菌對抗生素類物質毒性進行檢測的方法，其特征在于，所述四環素類抗生素，具體包括四環素CTC、土霉素OTC、金霉素TC、強力霉素。

7.根據權利要求1所述的用發光細菌對抗生素類物質毒性進行檢測的方法，其特征在于，所述的抗生素類物質為不溶或微溶物質時，在配置的抗生素類母液中加入二甲基亞砜，加入量不超過總體積的千分之一。

8.根據權利要求7所述的用發光細菌對抗生素類物質毒性進行檢測的方法，其特征在于，所述的不溶或微溶抗生素類物質是磺胺類抗生素。

9.根據權利要求5或8所述的用發光細菌對抗生素類物質毒性進行檢測的方法，其特征在于，所述的磺胺類抗生素為磺胺嘧啶SD、磺胺甲基嘧啶SM、磺胺甲惡唑SMZ。