[發明專利]膠乳增強免疫比濁法測定人甲胎蛋白含量的試劑盒

有效

• 申請號: 201210113245.6
• 申請日: 2012-04-17
• 公開（公告）號: CN102662061A
• 公開（公告）日: 2012-09-12
• 發明（設計）人: 徐麗;高愛民;劉希
• 申請（專利權）人: 北京九強生物技術股份有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 北京戈程知識產權代理有限公司 11314
• 代理人: 程偉;朱慧寧

1.一種膠乳增強免疫比濁法測定人甲胎蛋白含量的試劑盒，該試劑盒包括：甲胎蛋白R1試劑、甲胎蛋白R2試劑和甲胎蛋白校準品，其中：

所述甲胎蛋白R1試劑包含電解質、促凝劑、穩定劑、表面活性劑、防腐劑及緩沖液；

所述甲胎蛋白R2試劑包含抗人甲胎蛋白多克隆抗體包被膠乳顆粒、電解質、穩定劑、表面活性劑、防腐劑及緩沖液；

所述甲胎蛋白校準品包含防腐劑、電解質、穩定劑、甲胎蛋白抗原及緩沖液。

2.根據權利要求1所述的試劑盒，其中抗人甲胎蛋白多克隆抗體可選自雞、鴨、鵝等禽類的IgY抗體，優選雞IgY抗體。

3.根據權利要求1所述的試劑盒，其中抗人甲胎蛋白多克隆抗體通過使用人甲胎蛋白抗原親和純化而獲得。

4.根據權利要求1所述的試劑盒，其中膠乳顆粒為直徑范圍100～300nm、濃度為0.5～5mg/mL的聚苯乙烯膠乳顆粒，直徑優選150～250nm，更優選200nm。

5.根據權利要求1所述的試劑盒，其中膠乳顆粒表面由功能團修飾，該功能團選自羧基、氨基、羥基、酰肼或氯甲基，優選羧基。

6.根據權利要求1所述的試劑盒，其中抗體包被膠乳顆粒是通過化學交聯劑在交聯緩沖液中進行的，所用的化學交聯劑選自碳化亞胺、N-羥基琥珀酰亞胺、N-羥基硫代琥珀酰亞胺、酰肼、異氰酸酯或其組合；交聯緩沖液選自不含氨基的緩沖液，MES、MOPSO、MOPS、HEPES、磷酸鹽緩沖液，pH在6.0～8.0之間。

7.根據權利要求1所述的試劑盒，該試劑盒包括：甲胎蛋白R1試劑、甲胎蛋白R2試劑和甲胎蛋白校準品，其中：

所述甲胎蛋白R1試劑包含占其質量百分比為：0.1％～5.0％電解質、2％～6％促凝劑、0.1％～1％穩定劑、0.1％～1.0％表面活性劑、0.05％～0.1％防腐劑及pH7～9、濃度范圍為10～100mmol/L的緩沖液；

所述甲胎蛋白R2試劑包含抗人甲胎蛋白的多克隆抗體包被膠乳顆粒，還包含占其質量百分比為：0.1％～5.0％電解質、0.5％～5％穩定劑、0.1％～1.0％表面活性劑、0.05％～0.1％防腐劑及pH7～9、濃度范圍為10～100mmol/L的緩沖液；

所述甲胎蛋白校準品包含占其質量百分比為：0.01％～1.0％防腐劑、0.1％～5.0％電解質、0.05％～5.0％穩定劑、0～250ng/ml甲胎蛋白抗原及溶解在預處理的人血清基質中、pH?6.5～8.0、濃度為10～100mmol/L的緩沖液。

8.根據權利要求1或7所述的試劑盒，其中所述電解質選自無機鹽類，氯化鈉、氯化鉀、氯化鎂、硫酸鎂或其組合，優選氯化鈉。

9.根據權利要求1或7所述的試劑盒，其中所述穩定劑選自牛血清白蛋白、酪蛋白、魚皮明膠蛋白、葡萄糖、果糖、甘露糖、殼聚糖、山梨醇、乙二胺四乙酸二鈉或其組合。

10.根據權利要求1或7所述的試劑盒，其中所述促凝劑選自PEG-4000、PEG-6000、PEG-8000、硫酸葡聚糖鈉，優選PEG-6000。

11.根據權利要求1或7所述的試劑盒，其中所述表面活性劑選自吐溫系列、脂肪醇聚乙二醇醚類、聚氧乙烯苯基醚、聚氧乙烯月桂醚系列或其組合，優選吐溫20。

12.根據權利要求1或7所述的試劑盒，其中所述防腐劑選自疊氮鈉、苯酚、對羥基苯甲酸、對羥基苯甲酸乙酯、ProClin系列、三嗪類有機化合物等，優選疊氮鈉。

13.根據權利要求1或7所述的試劑盒，其中所述甲胎蛋白校準品中的甲胎蛋白選自自人體體液中提取、純化而得的天然甲胎蛋白，或自肝癌細胞株培養、純化而得的甲胎蛋白，純度≥95％。