[發明專利]龍腦樟規模化繁殖的生產方法

有效

• 申請號: 201210113023.4
• 申請日: 2012-04-17
• 公開（公告）號: CN102630459A
• 公開（公告）日: 2012-08-15
• 發明（設計）人: 葉清梅;李雪;張天進;黃雨花;陳艷紅;陳柳紅;楊雙霞
• 申請（專利權）人: 泉州市泉美生物科技有限公司
• 主分類號: A01G1/00
• 分類號: A01G1/00;A01H4/00
• 代理公司: 泉州市文華專利代理有限公司 35205
• 代理人: 車世偉

技術領域

本發明涉及植物繁殖技術領域，具體為一種龍腦樟[Cinnamomum?camphora(L.)Sie]規模化繁殖的生產方法。

背景技術

龍腦樟為樟科樟屬植物，常綠大喬木。原產印度尼西亞的蘇門答臘群島，是一種珍貴的富含芳香油類的藥用香料樹種和園林綠化樹種，亦是重要的化工原料和冰片(右旋龍腦)的天然植物資源(天然冰片是一種名貴中藥材和高級香料，亦是一種有效的透皮促進劑，其具有抗炎、抗心肌缺血、抗菌、止疼、防腐等作用)(程必強等，1997)。長期以來對龍腦樟的開發利用多以提取精油為主，過度采伐導致其資源嚴重破壞，尤其是優樹資源趨于枯竭。近年來其人工林發展規模急劇擴大，市場上對于龍腦樟優質苗木的需求不斷增長。要加速龍腦樟的產業開發，必須建立規模化的苗木和原料林基地，如何使龍腦樟優良母株的各種優良性狀在后代個體中遺傳性穩定，提高成活率和生長整齊度，是實現龍腦樟種苗產業開發、生產關鍵技術。

龍腦樟傳統的繁殖是采用種子育苗法，但種子繁殖最大的缺陷是后代個體變異性非常大，母株的諸多優良性狀，如高龍腦含量及抗病豐產性能在后代中很難穩定延續。采用組織培養技術不僅能克服上述缺陷，同時在短期內即可獲得大量優質苗木。目前龍腦樟的組織培養研究主要集中在無性系的建立方面，其大量優良苗木組培快繁體系還不夠完善。而且，一直存在龍腦樟組織培養中無菌材料難以獲得，快繁增殖系數低、生根苗根系差、容易脫葉、木質程度不夠等導致田間種植成活率低等客觀事實，大大限制了龍腦樟組織培養產業的發展。因此，需要對外植體培養技術，外植體無菌材料建立，增殖生根培養基配方研究、切割方法、培養條件等進行研究，提高快繁系數和最后種植成活率。

發明內容

本發明提供了一種龍腦樟規模化繁殖的生產方法，可有效解決龍腦樟在組織培養中存在繁殖系數低、生根苗根系不旺、木質化程度不夠、田間種植成活率低等問題。

一種龍腦樟規模化繁殖的生產方法，其特征在于包括如下步驟：

步驟1、母株選擇、外植體培育與預處理：

在春季，選擇優良、健壯、無病蟲害、經測定藥效成份穩定且右旋龍腦含量高的多年生龍腦樟為原種，從該龍腦樟原種上截取一年生的枝條作為扦插母本，在該扦插母本上剪取半木質化或已木質化枝條作為插穗，每個插穗帶1～2個節，經過消毒處理后扦插到基質中；待插穗成活，其根系完整、新芽長出且有新葉抽后，移到盆/缽中放置溫室進行常規扦插苗養護；當插穗的腋芽抽起10～15cm、枝條未木質化時，即可采集作為外植體，每個外植體長度約1～2.5cm；

步驟2、無菌材料獲得：

將采集好的外植體切去截面變色部分，接種于經滅菌好的4/5改良MS培養基中，培養條件為：溫度25±1.5℃，光照時間14±2H/D，光照強度3.75-6.25μmol·m^-2·s^-1，培養周期4～5周；

所述的改良MS培養基指的是，將習知的MS中的CaCl₂.2H₂O?440mg.L^-1改為等量的Ca(NO₃)₂.4H₂O，再添加檸檬酸50mg·L^-1、6-BA??2.0-6.0mg·L^-1、NAA?0.1-0.5mg·L^-1、蔗糖30g·L^-1、卡拉膠5.5g·L^-1、pH?5.7；

步驟3、無菌材料的馴化與繼代擴繁：

第一代無菌材料培養后，當頂芽抽出或莖段抽起長度大于20mm時，以1～2節為單位進行切割；當有側芽分化時，以2～4芽團進行方向性切割，將切割好的芽團接種于經滅菌好的3/4改良MS培養基中，培養條件為：溫度26±2℃，光照時間14±2H/D，光照強度18.75-22.5μmol·m^-2·s^-1，培養周期4～6周；