[發明專利]快速純化細菌莢膜多糖的方法有效
| 申請號: | 201210112371.X | 申請日: | 2012-04-17 |
| 公開(公告)號: | CN102660601A | 公開(公告)日: | 2012-09-12 |
| 發明(設計)人: | 李建平 | 申請(專利權)人: | 江蘇康泰生物醫學技術有限公司 |
| 主分類號: | C12P19/04 | 分類號: | C12P19/04;C08B37/00;C12R1/46;C12R1/21;C12R1/01 |
| 代理公司: | 常州市維益專利事務所 32211 | 代理人: | 周祥生 |
| 地址: | 213200 江蘇*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 快速 純化 細菌 莢膜 多糖 方法 | ||
1.快速純化細菌莢膜多糖的方法,包括以下步驟:
步驟一,莢膜多糖細菌的發酵:在裝有細菌培養基的發酵罐中發酵出特定莢膜多糖的細菌;
步驟二,加酸分離發酵液中的菌體和雜質:加酸調節步驟一所得發酵液的pH值,控制pH值≤5,用此方法來沉淀菌體和雜質;
步驟三,用微濾膜對步驟二所獲得的含有沉淀菌體和雜質的發酵液進行微濾,以去除其中的不溶顆粒物,包括菌體,沉淀雜質,殘留細胞碎片和不溶小顆粒物質;
步驟四,超濾濃縮和洗濾:用超濾膜濃縮和洗濾步驟三的微濾液,獲得粗制細菌莢膜多糖溶液。
2.根據權利要求1所述快速純化細菌莢膜多糖的方法,其特征是:所述細菌包括:肺炎球菌、b型流感嗜血桿菌、流行性腦膜炎球菌和傷寒桿菌。
3.根據權利要求1所述快速純化細菌莢膜多糖的方法,其特征是:在步驟二中所加的酸是磷酸、醋酸、鹽酸、硫酸或硝酸中的任意一種。
4.根據權利要求1所述快速純化細菌莢膜多糖的方法,其特征是:在步驟二中pH值的范圍是3.0~5.0。
5.根據權利要求1所述快速純化細菌莢膜多糖的方法,其特征是:在步驟四中所用微濾膜的膜孔徑為0.22,0.45,0.65,1.0μm中的任意一種。
6.根據權利要求1所述快速純化細菌莢膜多糖的方法,其特征是:在步驟四中所用的超濾膜是分子量為5kD至500kD范圍內的任意一種膜。
7.根據權利要求1所述快速純化細菌莢膜多糖的方法,其特征是:在步驟四中,洗濾所用溶液為純水、緩沖液或者鹽溶液或它們的混合液。
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