[發(fā)明專(zhuān)利]一種檢測(cè)腎上腺激素含量的方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210107015.9
• 申請(qǐng)日: 2012-04-13
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102680617A
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-09-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊亞玲;秦慧
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 昆明理工大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): G01N30/36
• 分類(lèi)號(hào): G01N30/36
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.一種檢測(cè)腎上腺激素含量的方法，其特征在于包括以下步驟：

（1）工作曲線的制作：配制1～300?ng/ml腎上腺素混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，注入高效液相色譜進(jìn)行分析，制作工作曲線，得到腎上腺素的檢測(cè)限和線性回歸方程；

（2）樣品處理：在待測(cè)生物樣品中加入1～2ml乙腈、0.1～0.5g氯化鈉、0.1～0.5g氯化鋅、0.1～0.5g醋酸鈉、0.1～0.5g硫酸鎂試劑中一種，混勻，在轉(zhuǎn)速5000～12000r/min下離心10～20min，取出上清液，用pH?5.5～8.0的磷酸二氫鉀-磷酸氫二鉀緩沖溶液稀釋至5ml，備用；

（3）分散液液微萃?。簩?00～300μl萃取劑，0.5～1.0ml?5%的衍生劑水楊醛和0.5～1.0?ml體積百分比濃度為0.05～0.1%的分散劑混勻，立即加入備用樣品中，超聲，形成乳濁體系，然后在3000～8000?r/min下離心2～10?min；

（4）樣品測(cè)定：吸取步驟（3）中離心管底部的有機(jī)相，過(guò)濾，在與步驟（1）相同色譜條件進(jìn)行HPLC分析，并對(duì)照步驟（1）所得的線性回歸方程，計(jì)算出樣品中腎上腺素的含量。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述檢測(cè)腎上腺激素含量的方法，其特征在于：腎上腺素為地塞米松、曲安奈德、丙酸倍率米松、丁酸氫化可的松、苯丙酸諾龍、潑尼松、醋酸可的松、甲基潑尼松龍中一種或幾種。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)腎上腺激素含量的方法，其特征在于：色譜條件為以乙腈-0.1wt%甲酸溶液作為流動(dòng)相，梯度洗脫為質(zhì)量百分比濃度80％乙腈洗脫0～3?min，質(zhì)量百分比濃度80％～90％乙腈洗脫3～6.5?min，質(zhì)量百分比濃度90％乙腈洗脫6.5～8?min。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)腎上腺激素含量的方法，其特征在于：生物樣品為全血或尿液，檢測(cè)前在-20℃下保存?zhèn)溆茫禾幚砹繛?.5～1.0ml，尿液的處理量為5.0ml。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)腎上腺激素含量的方法，其特征在于：萃取劑為二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳中一種。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)腎上腺激素含量的方法，其特征在于：分散劑為甲醇、乙腈、丙酮、非離子表面活性劑聚乙二醇辛基苯基醚Triton?X系列、非離子表面活性劑醇聚氧乙烯醚中一種。

7.?根據(jù)權(quán)利要求6所述的檢測(cè)腎上腺激素含量的方法，其特征在于：非離子表面活性劑聚乙二醇辛基苯基醚Triton?X系列試劑為T(mén)riton?X-100或Triton?X-114。

8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的檢測(cè)腎上腺激素含量的方法，其特征在于：非離子表面活性劑醇聚氧乙烯醚為T(mén)ergitol?TMN-6。