[發明專利]基于物理化學相結合的新型多糖硫酸化方法

無效

• 申請號: 201210105252.1
• 申請日: 2012-04-05
• 公開（公告）號: CN102659955A
• 公開（公告）日: 2012-09-12
• 發明（設計）人: 李衛旗
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;A61P39/06;G01N21/35;G01N21/78;G01N31/22
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.基于物理化學相結合的新型多糖硫酸化方法，其特征在于按以下步驟進行：

1)以香菇多糖作為參與反應的底物，香菇胞外多糖通過氣升式發酵產生的發酵液中提取，純化而獲得的均一純品多糖；

2)硫酸化試劑的制備：采用取代率較高的硫酸化體系——氯磺酸-吡啶體系：將氯磺酸緩慢滴加到裝有吡啶的容器中，滴加過程應在冰鹽浴中進行，并用磁力攪拌器攪拌，控制溫度在0攝氏度至4攝氏度以防過熱；

3)微波輔助法：將純品多糖溶解在甲酰胺中，硫酸化試劑緩慢滴加，攪拌均勻，利用微波爐進行反應，反應結束后，混合液調節至pH中性，并用酒精沉淀，離心復溶于水，濃縮透析，凍干，獲得硫酸化產品；

4)紅外檢測：KBr壓片法傅立葉紅外光譜儀檢測，400-4000cm^-1觀察硫酸取代的特殊峰；

5)SD檢測：碳水化合物含量的檢測采用苯酚硫酸法，硫酸根含量的檢測采用氯化鋇明膠法；

6)體外抗氧化活性的檢測

超氧根自由基清除能力：模擬黃嘌呤與黃嘌呤氧化酶反應體系產生超氧陰離子自由基，加入電子傳遞物質和griess顯色劑，在550nm比色，測試管中加入不同濃度的樣品，計算樣品的超氧陰離子清除能力；

氫氧根自由基清除能力：利用fenton反應產生羥自由基，給與電子受體后，用griess顯色，550nm比色，測試管中加入不同濃度的樣品，計算樣品的羥基陰離子清除能力。