[發(fā)明專利]銀杏蜜環(huán)復(fù)方制劑的質(zhì)量檢測(cè)方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210096706.3
• 申請(qǐng)日: 2012-04-05
• 公開（公告）號(hào): CN103364520A
• 公開（公告）日: 2013-10-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王立強(qiáng)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 王立強(qiáng)
• 主分類號(hào): G01N30/90
• 分類號(hào): G01N30/90;G01N30/02
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• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及藥物的質(zhì)量檢測(cè)方法，具體涉及銀杏蜜環(huán)復(fù)方制劑的的質(zhì)量檢測(cè)方法，尤其是采用薄層色譜法鑒別蜜環(huán)菌粉、采用高效液相色譜法測(cè)定腺苷的含量的質(zhì)量檢測(cè)方法。

背景技術(shù)

銀杏蜜環(huán)復(fù)方制劑是選用近代天然植物藥研究的熱點(diǎn)活性物質(zhì)銀杏葉提取物，與我國(guó)傳統(tǒng)中藥天麻蜜環(huán)菌的有效成份進(jìn)行科學(xué)組方，運(yùn)用現(xiàn)代制劑工藝制成的復(fù)方制劑，目前國(guó)內(nèi)只有銀杏蜜環(huán)口服溶液一種劑型上市生產(chǎn)銷售。

銀杏葉是一種具有很高藥用價(jià)值的植物，銀杏樹是中國(guó)古老的樹種之一，地球生命歷經(jīng)千億年的變動(dòng)，尤其是第四世紀(jì)冰川覆蓋之后，只有銀杏仍保持它最原始的面貌，在生物演化學(xué)史上被稱為“活化石”。銀杏葉在以往的本草之類藥書中記載較少，直到20世紀(jì)30年代，日本和西德才開始了銀杏葉的研究。隨著現(xiàn)代藥理研究的不斷深入，發(fā)現(xiàn)銀杏葉中不但含有黃酮類物質(zhì)，而且還有萜內(nèi)酯類、酚類等化合物，它們卓越的藥理作用已被人們逐漸認(rèn)識(shí)，臨床應(yīng)用范圍逐步擴(kuò)大。

銀杏葉提取物在人體中的作用，主要是增強(qiáng)血管張力、擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈，軟化血管、改善血管通透性，降低血壓、降低血脂及膽固醇，抗血小板凝集、減少血栓形成，降低血管內(nèi)的高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、甘油三酯(TG)，從而達(dá)到降血壓、降血脂、降血粘的功效。

現(xiàn)代研究表明銀杏葉含黃酮類成分銀杏雙黃酮(ginkgetin)、異銀杏雙黃酮(isoginkgetin)、去甲基銀杏雙黃酮(bilobetin)、蕓香甙、山柰素-3-鼠李糖葡萄糖甙、山柰素、槲皮素、異鼠李素(isorhamnetin)等；另含苦味成分銀杏三內(nèi)酯A(ginkgolideA)、B、C及銀杏新內(nèi)酯A(bilobalide?A)；酸類成分毒八角酸(shikimic?acid)、D-糖質(zhì)酸(D-glucaric?acid)、白果酸(ginkgolic?acid).尚含白果醇(ginnol)、白果酮(ginnone)、廿九烷、廿八醇、α-已烯醛、β-谷甾醇、豆甾醇及維生素等。

目前國(guó)內(nèi)外對(duì)銀杏葉提取物的定性定量檢測(cè)研究較深入，《中華人民共和國(guó)藥典2010版》銀杏葉提取物標(biāo)準(zhǔn)中，既有定性鑒別方法，也有總黃酮醇苷及萜類內(nèi)酯兩個(gè)定量測(cè)定方法。

蜜環(huán)菌屬擔(dān)子菌綱傘菌目真菌的一屬，是天麻不可缺少的互惠共生菌。蜜環(huán)菌分布很廣，國(guó)內(nèi)大部分省市均有。蜜環(huán)菌營(yíng)養(yǎng)豐富，還具有藥用價(jià)值。據(jù)報(bào)道，干菇含粗蛋白11.4％，

脂肪5.2％，碳水化合物75.9％，纖維素5.8％，灰分7.5％，熱量384千卡。蜜環(huán)菌的固體發(fā)酵制品可代替天麻入藥，對(duì)高血壓椎基底動(dòng)脈供血不足、美尼爾氏癥、植物神經(jīng)功能紊亂等疾病引起眩暈的病人，治療效果較好，對(duì)肢麻、失眠、耳鳴、中風(fēng)后遺癥等也有一定的療效。

目前對(duì)蜜環(huán)菌化學(xué)成分的研究相比銀杏葉提取物要落后很多，主要集中在脂溶性的倍半萜芳香酸酯類化合物以及水溶性的蜜環(huán)菌胞內(nèi)多糖類成分。由于化學(xué)成分研究薄弱，所以對(duì)蜜環(huán)菌的定性定量檢測(cè)研究就更少了，為數(shù)不多的研究都是集中在蜜環(huán)菌的石油醚提取物等脂溶性成分，對(duì)于蜜環(huán)菌水溶性成分則沒有專屬性的定性定量檢測(cè)方法，

目前唯一獲準(zhǔn)上市的銀杏蜜環(huán)口服溶液，該產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)收載于國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局《國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)-化學(xué)藥品地方標(biāo)準(zhǔn)上升國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)》第十六冊(cè)，標(biāo)準(zhǔn)號(hào)WS₁-XG-004-2001。該標(biāo)準(zhǔn)中僅有銀杏葉提取物的薄層鑒別方法和銀杏葉總黃酮醇苷的含量測(cè)定方法，缺乏蜜環(huán)菌的定性鑒別項(xiàng)目和含量測(cè)定項(xiàng)目，不能反映出產(chǎn)品是否含有蜜環(huán)菌有效成分及產(chǎn)品中蜜環(huán)菌的含量，無(wú)法有效檢測(cè)制劑產(chǎn)品的質(zhì)量。

發(fā)明內(nèi)容

由于銀杏蜜環(huán)復(fù)方制劑制備工藝中，對(duì)蜜環(huán)菌采用水提醇沉工藝，因此該制劑中基本不含有蜜環(huán)菌倍半萜芳香酸酯類化合物等脂溶性成分，也沒有多糖類成分。發(fā)明人經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)，克服了現(xiàn)有技術(shù)中的不足，研究出了針對(duì)銀杏蜜環(huán)復(fù)方制劑中的蜜環(huán)菌水溶性成分的定性定量檢測(cè)方法，即采用薄層色譜法鑒別銀杏蜜環(huán)復(fù)方制劑中含有蜜環(huán)菌粉；采用高效液相色譜法測(cè)定銀杏蜜環(huán)復(fù)方制劑中腺苷的含量。

薄層色譜法鑒別銀杏蜜環(huán)制劑中含有蜜環(huán)菌粉的條件是：

色譜條件：薄層板硅膠G

展開劑正丁醇-乙酸-水(4∶1∶1～7∶1∶1)

顯色劑茚三酮乙醇溶液

對(duì)照品溶液的制備：取蜜環(huán)菌對(duì)照藥材加水，煮沸，保持微沸，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)酉∫掖既芙猓鳛閷?duì)照藥材溶液；

供試品溶液的制備：取本品，加乙醇和水，超聲處理，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)酉∫掖既芙猓鳛楣┰嚻啡芤海?/p>