[發(fā)明專利]一種檢測(cè)硝基呋喃類藥物的試紙及方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210096477.5
• 申請(qǐng)日: 2012-04-01
• 公開（公告）號(hào): CN103364554A
• 公開（公告）日: 2013-10-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 何方洋;萬宇平;陶光燦;孫震;崔海峰;馮靜;余厚美;何麗霞;田甜;湯慶彩
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 北京勤邦生物技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/577
• 分類號(hào): G01N33/577;G01N33/531;G01N33/532
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種檢測(cè)硝基呋喃類試紙的方法及其專用試紙。?

背景技術(shù)

硝基呋喃類藥物是人工合成的具有5-硝基呋喃基本結(jié)構(gòu)的廣譜抗菌藥物，主要是指呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃西林、呋喃妥因，硝基呋喃類藥物因有非常好的抗菌作用和藥動(dòng)力學(xué)的特性，曾經(jīng)被廣泛應(yīng)用，并作為禽類、水產(chǎn)和豬的促生長(zhǎng)添加劑。但在長(zhǎng)時(shí)間的實(shí)驗(yàn)研究過程中發(fā)現(xiàn)，硝基呋喃類藥物和代謝物均可以使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物發(fā)生癌變和基因突變，因此此類藥物禁止在治療和飼料中使用。?

用來檢測(cè)呋喃妥因代謝物的最常用方法是HPLC，LC-MS和LC-MS/MS，由于復(fù)雜的儀器設(shè)備和繁瑣的過程，不適合現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)控和大量樣本篩查。?

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種檢測(cè)硝基呋喃類藥物的試紙。?

本發(fā)明所提供的檢測(cè)硝基呋喃類藥物的試紙，包括結(jié)合物釋放墊、樣品吸收墊、反應(yīng)膜和吸水墊，其依次連接；所述結(jié)合物釋放墊上包被有膠體金標(biāo)記的硝基呋喃類藥物特異性抗體；硝基呋喃類藥物特異性抗體可為硝基呋喃類藥物多克隆抗體或硝基呋喃類藥物單克隆抗體；反應(yīng)膜上包被有檢測(cè)區(qū)和質(zhì)控區(qū)；當(dāng)硝基呋喃類藥物特異性抗體為硝基呋喃類藥物多克隆抗體時(shí)，檢測(cè)區(qū)包被硝基呋喃類半抗原-載體蛋白偶聯(lián)物，質(zhì)控區(qū)包被羊抗兔抗抗體；當(dāng)硝基呋喃類藥物特異性抗體為硝基呋喃類藥物單克隆抗體時(shí)，檢測(cè)區(qū)包被硝基呋喃類半抗原-載體蛋白偶聯(lián)物，質(zhì)控區(qū)包被羊抗鼠抗抗體；所述半抗原如下：?

其中，所述結(jié)合物釋放墊中有1/3-1/2區(qū)域被所述樣品吸收墊覆蓋。?

所述反應(yīng)膜包被有檢測(cè)區(qū)和質(zhì)控區(qū)，其中所述的檢測(cè)區(qū)位于近于所述結(jié)合物釋放墊的末端的一側(cè)，所述質(zhì)控區(qū)位于遠(yuǎn)離所述結(jié)合物釋放墊的末端的一側(cè)；所述檢測(cè)區(qū)距所述結(jié)合物釋放墊的末端5-8mm，優(yōu)選為6mm；所述質(zhì)控區(qū)距所述檢測(cè)區(qū)4-7mm，優(yōu)選為5mm。?

所述檢測(cè)區(qū)和所述質(zhì)控區(qū)均為與所述試紙條的長(zhǎng)相垂直的條帶狀。?

所述結(jié)合物釋放墊包被膠體金標(biāo)記的硝基呋喃類藥物單克隆抗體，其包被密度為0.1-0.2μg/cm²，優(yōu)選0.1μg/cm²。?

所述硝基呋喃類藥物抗體是由硝基呋喃類半抗原-載體蛋白偶聯(lián)物免疫制備得到；所述抗抗體可為羊抗鼠IgG；所述載體蛋白可為卵血清蛋白、人血清白蛋白、牛血清白蛋白、血藍(lán)蛋白或甲狀腺蛋白等。?

所述試紙中包括底板，所述樣品吸收墊、結(jié)合物釋放墊、反應(yīng)膜和吸水墊黏貼在所述底板上。?

所述試紙具體可為條狀；為了便于使用，所述條狀的試紙可以覆蓋有保護(hù)膜或裝在盒內(nèi)。?

所述保護(hù)膜可以覆蓋所述試紙的兩端(樣品吸收墊、結(jié)合物釋放墊和吸水墊)?

所述盒由底座和蓋構(gòu)成，底座和蓋通過卡齒和卡孔相連接；所述底座上有與所述蓋連接的卡齒和與所述試紙相匹配的凹槽；所述蓋上有加樣孔、觀察窗和與底座卡齒相配的卡孔，所述加樣孔的位置與所述樣品吸收墊的位置相對(duì)應(yīng)，所述觀察窗與所述反應(yīng)膜上的檢測(cè)區(qū)和質(zhì)控區(qū)相對(duì)應(yīng)；所述試紙位于所述凹槽內(nèi)；所述觀察窗上印有T和C，T表示檢測(cè)線，在靠近所述加樣孔側(cè)，C表示質(zhì)控線，在遠(yuǎn)離所述加樣孔側(cè)。?

底板可由不吸水的韌性材料制成，如硬質(zhì)塑料、不吸水硬紙，具體可為PVC板材；樣品吸收墊可由玻璃纖維棉、聚酯材料(聚酯絲或聚酯棉)、尼龍膜、聚偏二氟乙烯膜或聚酯膜制成；結(jié)合物釋放墊可由玻璃纖維制成；吸水墊可為吸濾紙或慮油紙；反應(yīng)膜可為硝酸纖維素膜或?yàn)榧兝w維素膜；所述保護(hù)膜可為PE材質(zhì)的保護(hù)膜。?

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種制備上述試紙的方法。?

本發(fā)明所提供的制備上述試紙的方法，是將樣品吸收墊、結(jié)合物釋放墊、反應(yīng)膜和吸水墊依次連接；所述結(jié)合物釋放墊上包被有膠體金標(biāo)記的硝基呋喃類藥物特?異性抗體；所述硝基呋喃類藥物特異性抗體為硝基呋喃類藥物多克隆抗體或硝基呋喃類藥物單克隆抗體；所述反應(yīng)膜上包括檢測(cè)區(qū)和質(zhì)控區(qū)，檢測(cè)區(qū)包被有硝基呋喃類半抗原和載體蛋白的偶聯(lián)物，質(zhì)控區(qū)包被有抗抗體；?

所述樣品吸收墊在進(jìn)行所述連接前，先在如下溶液中浸泡1-3h，再進(jìn)行干燥：含0.5-0.8％(體積百分含量)酪蛋白、pH值為9.6-10.0、0.1-0.2mol/L的碳酸鹽緩沖液；?