[發明專利]檢測硝基咪唑類藥物的酶聯免疫試劑盒及其應用

有效

• 申請號: 201210096409.9
• 申請日: 2012-04-01
• 公開（公告）號: CN103364553A
• 公開（公告）日: 2013-10-23
• 發明（設計）人: 萬宇平;吳鵬;羅曉琴;孫震;馮靜;余厚美;趙正苗;段盈盈;何麗霞;李曉芳
• 申請（專利權）人: 北京勤邦生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/531;C07D233/94
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種檢測硝基咪唑類藥物的酶聯免疫試劑盒，其特征在于它含有：

(1)包被有甲硝唑偶聯抗原的酶標板；

(2)酶標記抗抗體；

(3)硝基咪唑類藥物特異性抗體；

(4)甲硝唑標準品溶液；

(5)底物顯色液；

(6)終止液；

(7)濃縮洗滌液；

(8)復溶液。

2.如權利要求1所述的試劑盒，其特征在于所述甲硝唑偶聯抗原是由甲硝唑半抗原與載體蛋白偶聯得到，所述甲硝唑半抗原結構如下：

3.如權利要求2所述的試劑盒，所述甲硝唑半抗原通過以下步驟得到：0.85g甲硝唑和1.0g琥珀酸酐，加入10ml吡啶，室溫下攪拌12-20小時，蒸干溶劑，乙酸乙酯溶解，飽和氯化銨溶液洗滌，水洗，干燥，除去溶劑后在環己烷-乙酸乙酯中重結晶得到白色固體，為甲硝唑半抗原。

4.如權利要求1所述的試劑盒，其特征在于所述硝基咪唑類藥物特異性抗體為硝基咪唑類藥物單克隆抗體。

5.如權利要求1所述的試劑盒，其特征在于所述酶標記物的標記酶為辣根過氧化物酶或細菌提取堿性磷酸酯酶，當標記酶為辣根過氧化物酶時，底物顯色液A液為過氧化氫或過氧化脲，底物顯色液B液為鄰苯二胺或四甲基聯苯胺，終止液為1～2mol/L的硫酸或鹽酸緩沖液；當標記酶為細菌提取堿性磷酸酯酶時，底物顯色液為對硝基磷酸鹽緩沖液、終止液為1～2mol/L氫氧化鈉。

6.如權利要求書1所述的試劑盒，其特征在于所用包被緩沖液為pH9.0-9.6，0.1-0.2mol/L碳酸鹽緩沖液，所用封閉液為pH7.2-7.6，含有0.5-0.8％脫脂奶粉，0.1mol/L磷酸鹽緩沖液，所述百分比為重量百分比。

7.如權利要求1所述的試劑盒，其特征在于：濃縮洗滌液為pH7.2-7.6，含有0.5-1.0％吐溫20，0.01-0.04‰疊氮化鈉的0.1-0.2mol/L磷酸鹽緩沖液；復溶液為含有pH?6.5-6.8含有5-10％酪蛋白的0.1-0.2mol/L磷酸鹽緩沖液，所述百分比為重量百分比。

8.如權利要求1所述的試劑盒，其特征在于：甲硝唑標準品溶液的濃度為0μg/L、0.05μg/L、0.15μg/L、0.6μg/L、2.4μg/L、9.6μg/L。

9.一種檢測樣品中硝基咪唑類藥物含量的方法，包括步驟：

(1)樣品前處理；

(2)用權利要求1-8任一項所述的試劑盒進行檢測；

(3)分析檢測結果。