[發明專利]快速純化及制備細菌PCR反應模板的方法無效
| 申請號: | 201210095106.5 | 申請日: | 2012-03-31 |
| 公開(公告)號: | CN102533739A | 公開(公告)日: | 2012-07-04 |
| 發明(設計)人: | 解宇 | 申請(專利權)人: | 杭州師范大學 |
| 主分類號: | C12N15/10 | 分類號: | C12N15/10;C12Q1/68;C12R1/19 |
| 代理公司: | 杭州裕陽專利事務所(普通合伙) 33221 | 代理人: | 應圣義 |
| 地址: | 310018 浙江*** | 國省代碼: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 快速 純化 制備 細菌 pcr 反應 模板 方法 | ||
1.快速純化及制備細菌PCR反應模板的方法,其特征在于,包括以下步驟:
步驟a:牛糞便標本中添加PBS溶液5?mL,混勻,1000?r/min離心30?s,去除大顆粒的雜質;
步驟b:向含菌的牛糞稀釋液中添加免疫BMPs?0.3?mg,混合均勻,反應30?min后進行磁性誘導,從牛糞中分離出磁性凝集物;
步驟c:分離出來的磁性凝集物使用PBS溶液分散清洗3次,清洗后,添加滅菌雙蒸水100?μL,分散,重新振蕩懸浮后至95℃加熱5?min;再經12000?r/min離心5?min;
步驟d:回收上清液,制得PCR反應模板。
2.根據權利要求1所述的快速純化及制備細菌PCR反應模板的方法,其特征在于:所述的PBS溶液的ph值為6.8。
3.根據權利要求1所述的快速純化及制備細菌PCR反應模板的方法,其特征在于:所述的磁性誘導采用普通磁石進行誘導。
4.根據權利要求1所述的快速純化及制備細菌PCR反應模板的方法,其特征在于:所述的牛糞便標本中的大腸桿菌O157濃度為1~104?cfu/g。
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