[發明專利]細胞凋亡顯像藥物68Ga-NOTA-Duramycin及其制備方法

有效

• 申請號: 201210091388.1
• 申請日: 2012-03-31
• 公開（公告）號: CN102614536A
• 公開（公告）日: 2012-08-01
• 發明（設計）人: 王峰;汪蕾;方緯;華子春
• 申請（專利權）人: 南京市第一醫院;中國醫學科學院阜外心血管病醫院
• 主分類號: A61K51/08
• 分類號: A61K51/08;A61K103/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及用于檢測細胞凋亡的顯像藥物，特別涉及以磷脂酰乙醇胺為結合靶點的顯像藥物及其制備方法。

背景技術

細胞凋亡是一種主動發生的、受基因嚴密調控的細胞逐漸死亡現象，在許多疾病，如：心血管疾病和腫瘤的發生、發展和轉歸中都具有重要的作用。

細胞凋亡是心梗早期心肌細胞的主要死亡形式，也是梗死范圍擴大的獨立預后因子；心肌細胞凋亡的持續存在和活性細胞的持續性缺失，是心衰進行性發展的主要機制；心肌細胞凋亡增多也是心肌炎發展為擴張型心肌病，進而發展為心衰的重要機制之一。

腫瘤的發生主要是由于細胞內癌基因、抑癌基因及其他相關調節基因突變，從而使細胞基因組失去穩定性。正常情況下，當修復機制不能完成損傷修復時，細胞凋亡機制將啟動，異常細胞將被吞噬細胞識別而清除。如果調節機制出現障礙，凋亡機制不能正常啟動，帶有不穩定基因組的細胞發生失控性增殖，就很可能產生高度惡化狀態的腫瘤細胞。在細胞癌變過程中，許多凋亡活化基因功能受阻，而凋亡抑制基因的功能得到增強。研究發現，許多腫瘤的發生機制就是由于凋亡受阻引起的。在腫瘤治療方面，選擇性誘導腫瘤細胞凋亡是目前最主要的治療策略和目標。臨床上采用的放射治療、大多數化療藥物和生物治療劑都是主要通過誘導細胞凋亡來清除腫瘤細胞的，以誘導細胞凋亡為目標的基因治療也是目前重要的研究方向。

因此，細胞凋亡的檢測對于心血管疾病和腫瘤的診斷和療效監測都具有極為重要的臨床意義。分子影像技術被認為是檢測細胞凋亡最有效的無創性方法。目前，國內外研究較多的分子探針是^99mTc-AnnexinV，它能與凋亡細胞表面的磷脂酰絲氨酸(PtdS)位點特異結合。研究表明：^99mTc-AnnexinV顯像能夠顯示心肌、血管、腫瘤、炎癥等組織的凋亡細胞，在急性心肌梗塞、心肌炎、心臟移植排異反應、不穩定動脈粥樣硬化斑塊、腫瘤化療等方面有一定的應用價值。但^99mTc-AnnexinV還存在著明顯的不足，一是AnnexinV分子量較大(36kDa)血液清除較慢，早期成像圖像質量欠佳；二是用于單光子核素成像，分辨率受限；三是生產成本高，價格昂貴。因此，該顯像劑的實際應用受到了很大限制，目前的市場表現也不理想。

發明內容

為克服上述不足，本發明的目的在于提供一種更為理想的細胞凋亡顯像劑⁶⁸Ga-NOTA-Duramycin，其主要特點在于針對的結合靶點為磷脂酰乙醇胺(PtdE)，其主要結構Duramycin(耐久霉素)由19個氨基酸組成，與雙功能螯合劑1，4，7-三氮雜環壬烷-1，4-7-三乙酸(1，4，7-triazacyclononane-1，4，7-triacetic?acid，NOTA)耦合，后者提供放射性正電子核素⁶⁸Ga標記位點。

與^99mTc-AnnexinV相比，⁶⁸Ga-NOTA-Duramycin具有明顯的優勢。首先，Duramycin分子量僅為2KD，遠小于AnnexinV，因此血液清除較快，放射性本底較低，可提高早期圖像質量；第二，Duramycin的結合位點PtdE在細胞膜磷脂中占約20％，是其含量是AnnexinV結合位點磷脂酰絲氨酸(PtdS)的3～4倍；第三，⁶⁸Ga-NOTA-Duramycin用于正電子核素顯像(PET)，其分辨率明顯高于單光子核素顯像(SPECT)。

為達到上述目的，本發明的主要技術方案如下：由鏈酶菌屬肉桂地菌DSM40005表達和后翻譯修飾合成Duramycin；化學偶聯制備出NOTA-Duramycin；采用直接標記法，取PH4.2、0.1M的乙酸-乙酸鈉緩沖液150μL加入到含50μg?NOTA-Duramycin的標記瓶中，20℃輕輕振蕩混勻5min，然后加入放射性活度為370～740MBq(10～20mCi)、體積為100～300μL的⁶⁸Ga淋洗液，輕輕振蕩混勻后靜置15min，得到⁶⁸Ga-NOTA-Duramycin。

進一步地，是⁶⁸Ga-NOTA-Duramycin作為顯像劑用于檢測心肌缺血損傷后心肌細胞凋亡方面的應用。

進一步地，是⁶⁸Ga-NOTA-Duramycin作為顯像劑用于化療后檢測腫瘤細胞凋亡方面的應用。

附圖說明