[發(fā)明專利]一種鑒定鼠尾藻性別的方法無效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201210089750.1 | 申請(qǐng)日: | 2012-03-30 |
| 公開(公告)號(hào): | CN102605086A | 公開(公告)日: | 2012-07-25 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 劉福利;王飛久;孫修濤;汪文俊 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所 |
| 主分類號(hào): | C12Q1/68 | 分類號(hào): | C12Q1/68 |
| 代理公司: | 青島聯(lián)智專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 37101 | 代理人: | 李升娟 |
| 地址: | 266071 山*** | 國(guó)省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 鑒定 鼠尾藻 性別 方法 | ||
1.一種鑒定鼠尾藻性別的方法,其特征是所述方法包括以下步驟:鼠尾藻基因組DNA的提取和純化;利用特異性分子標(biāo)記S64對(duì)基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增;所述S64能擴(kuò)增出特異性標(biāo)記F289即為雌性鼠尾藻,不能擴(kuò)增出的即為雄性鼠尾藻,
所述特異性分子標(biāo)記S64引物序列為:5′-CCTCCAGTGT-3′;
所述特異性標(biāo)記F289序列如SEQ?ID?No:1所示。
2.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的一種鑒定鼠尾藻性別的方法,其特征在于:選取鼠尾藻的幼嫩組織提取基因組DNA。
3.根據(jù)權(quán)利要求2中所述的一種鑒定鼠尾藻性別的方法,其特征在于:所述幼嫩組織為嫩葉、生殖托或次生小枝。
4.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的一種鑒定鼠尾藻性別的方法,其特征在于:PCR擴(kuò)增體系為:10?μl反應(yīng)體積中含有50?mM?Tris-HCl,1.5?mM?MgCl2,0.2?mM?DNTP,0.8%?聚蔗糖400,1?mM?酒石黃,5?μM?BSA,30?ng引物,5?ng模板DNA,0.5單位Taq?DNA聚合酶。
5.根據(jù)權(quán)利要求4中所述的一種鑒定鼠尾藻性別的方法,其特征在于:所述Tris-HCl?的pH為8.3。
6.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的一種鑒定鼠尾藻性別的方法,其特征在于:PCR擴(kuò)增程序?yàn)椋?4?℃?4分鐘,按94?℃?20秒,36?℃?20秒,72?℃?60?秒,進(jìn)行40個(gè)循環(huán),最后72?℃保溫5?分鐘。
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