[發明專利]檢測苦參綠茶復方制劑的方法

有效

• 申請號: 201210088190.8
• 申請日: 2012-03-29
• 公開（公告）號: CN102636585A
• 公開（公告）日: 2012-08-15
• 發明（設計）人: 黃璐;陳順欽;張思佳;牟峰;楊煥明
• 申請（專利權）人: 武漢華大藥業有限公司;武漢華大基因科技有限公司;深圳華大基因科技有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/36
• 代理公司: 北京清亦華知識產權代理事務所(普通合伙) 11201
• 代理人: 李志東

1.一種檢測苦參綠茶復方制劑的方法，其特征在于，包括以下步驟：

從所述苦參綠茶復方制劑中提取有效成分，所述有效成分為選自表沒食子兒茶素沒食子酸酯、氧化苦參堿和苦參堿的至少一種；以及

利用高效液相色譜進行檢測，以便確定所述有效成分的含量，

其中，

任選地，所述苦參綠茶復方制劑的劑型為選自軟膏、栓劑、凝膠劑、片劑和噴霧劑的至少一種，

任選地，所述有效成分為表沒食子兒茶素沒食子酸酯，并且從所述苦參綠茶復方制劑中提取有效成分進一步包括：

使用第一溶劑，對所述苦參綠茶復方制劑進行提取，以便獲得含有表沒食子兒茶素沒食子酸酯的提取液，

其中，所述第一溶劑包含甲醇和三氯甲烷，優選所述第一溶劑進一步包含冰醋酸，

更優選所述第一溶劑中甲醇、三氯甲烷和冰醋酸的體積比為(4.5～5)∶(20～21)∶(0～1)，

最優選所述第一溶劑中甲醇、三氯甲烷和冰醋酸的體積比為4.5∶20.5∶0.5。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述苦參綠茶復方制劑與所述第一溶劑的用量比例滿足下列比例關系：

所述苦參綠茶復方制劑的重量為0.15-1.0g；

所述甲醇的體積為20.5ml；

所述三氯甲烷的體積為4.5ml；以及

所述冰醋酸的體積為0.5ml。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，對所述苦參綠茶復方制劑進行超聲提取和回流提取的至少一種，優選對所述苦參綠茶復方制劑進行超聲提取，更優選對所述苦參綠茶復方制劑提取15-60分鐘，最優選對所述苦參綠茶復方制劑進行超聲提取45分鐘。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，在進行利用高效液相色譜檢測之前，使所述表沒食子兒茶素沒食子酸酯的含量處于10.35微克/ml～414微克/ml之間。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，針對所述表沒食子兒茶素沒食子酸酯，高效液相色譜檢測：

采用十八烷基硅烷鍵合硅膠作為填充劑；以及

采用乙腈和0.1體積％甲酸溶液的混合物作為流動相，其中所述乙腈和0.1體積％甲酸溶液的體積比為10～30∶90～70，優選所述乙腈和0.1體積％甲酸溶液的體積比為15∶85，

其中，

任選地，所述流動相的流速為1ml/min，或者檢測波長為279nm，

任選地，所述有效成分為氧化苦參堿和苦參堿，并且從所述苦參綠茶復方制劑中提取有效成分進一步包括：

使用第二溶劑，對所述苦參綠茶復方制劑進行提取，以便獲得含有氧化苦參堿和苦參堿的提取液，其中，所述第二溶劑包含氨水和有機溶劑，所述有機溶劑為選自乙醇和三氯甲烷的至少一種。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述第二溶劑由氨水和三氯甲烷構成，優選所述第二溶劑中氨水和三氯甲烷的體積比為(0.5～1)∶(25)。

7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述第二溶劑中氨水和三氯甲烷的體積比為0.5∶25，

任選地，所述苦參綠茶復方制劑與所述第二溶劑的用量比例滿足下列比例關系：

所述苦參綠茶復方制劑的重量為0.15-1.0g；

所述三氯甲烷的體積為25ml；以及

所述氨水的體積為0.5ml。

8.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，對所述苦參綠茶復方制劑進行浸漬提取、超聲提取和回流提取的至少一種，優選對所述苦參綠茶復方制劑進行超聲提取，更優選對所述苦參綠茶復方制劑提取15-60分鐘，最優選對所述苦參綠茶復方制劑進行超聲提取45分鐘。

9.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，在進行利用高效液相色譜檢測之前，使所述苦參堿的含量處于11.1微克/ml～177.6微克/ml之間，所述氧化苦參堿的含量處于21.5微克/ml～344微克/ml之間，

其中，

任選地，針對所述氧化苦參堿和苦參堿，高效液相色譜檢測：

采用氨基鍵合硅膠作為填充劑；以及

采用6.6體積％磷酸溶液、無水乙醇和乙腈的混合物作為流動相，其中所述6.6體積％磷酸溶液、無水乙醇和乙腈的體積比為(5～10)∶(5～10)∶(90～80)，優選所述6.6體積％磷酸溶液、無水乙醇和乙腈的體積比為7∶8∶85，

任選地，所述流動相的流速為1ml/min，

任選地，檢測波長為220nm。