[發明專利]多發性骨髓瘤易感基因無創檢測試劑盒

無效

• 申請號: 201210086694.6
• 申請日: 2012-03-28
• 公開（公告）號: CN102605080A
• 公開（公告）日: 2012-07-25
• 發明（設計）人: 潘加奎;姜麗
• 申請（專利權）人: 解碼(上海)生物醫藥科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種檢測多發性骨髓瘤易感基因無創檢測試劑盒，其特征在于：檢測MTHFR基因上C677T位點及A1298C位點多態性，NQO1基因上C609T位點多態性，GSTT1基因缺失與否(Present/Null)位點多態性的4個單核苷酸多態性位點基因型的特異性引物與DNA測序引物、Taq酶、dNTP混合液、反應緩沖液、SAP酶、ExoI酶、BigDye?mix、EDTA溶液、70％乙醇溶液、100％乙醇溶液、HIDI溶液、ddH₂O等。

2.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于：所述的特異性引物對是指針對MTHFR基因上C677T位點及A1298C位點多態性，NQO1基因上C609T位點多態性，GSTT1基因缺失與否(Present/Null)位點多態性的4個單核苷酸多態性位點，能特異性擴增出包含這4個SNPs位點的DNA片段的引物對。

3.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于：所述的DNA測序引物是針對MTHFR基因上C677T位點及A1298C位點多態性，NQO1基因上C609T位點多態性，GSTT1基因缺失與否(Present/Null)位點多態性的4個單核苷酸多態性位點而設計，能通過DNA測序技術特異性檢測出上述4個SNPs位點基因型的DNA測序引物。

4.根據權利要求1所示的試劑盒，其特征在于，所含的4對特異性引物序列如下：

(1)MTHFR(C677T)正向引物：5′AGGGAGGCTTCAACTACGC3′

MTHFR(C677T)反向引物：5′GCGGTTGAGGGTGTAGAAGT3′

(2)MTHFR(A1298C)正向引物：5′GCCTCCAGACCAAAGAGTTACAT3′

MTHFR(A1298C)反向引物：5′CCACTCCAGCATCACTCACTTT3′

(3)NQO1(C609T)正向引物：5′TGGCACAGTTTCAAGGTTTATG3′

NQO1(C609T)反向引物：5′TATTCTCCAGGCGTTTCTTCC3′

(4)GSTT1(Null/Present)正向引物：5′GAACTCCCTGAAAAGCTAAAGC?3′

GSTT1(Null/Present)反向引物：5′GTTGGGCTCAAATATACGGTGG3′。

5.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所含的4條DNA測序引物序列如下：

(1)MTHFR(C677T)測序引物：5′AGGGAGGCTTCAACTACGC3′

(2)MTHFR(A1298C)測序引物：5′GCCTCCAGACCAAAGAGTTACAT3′?

(3)NQO1(C609T)測序引物：5′TGGCACAGTTTCAAGGTTTATG3′

(4)GSTT1(Null/Present)測序引物：5′GAACTCCCTGAAAAGCTAAAGC?3′。

6.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于試劑盒的組分和含量包括：(1)PCR反應體系：10×PCR反應緩沖液2.5ul，25mM?dNTP混合液0.2ul，5U/ul?Taq?DNA聚合酶0.125ul，20uM特異性引物對，每條引物各0.25ul，ddH₂O?19.175ul。

(2)PCR產物純化體系：1U/ul?SAP酶0.75ul，10U/ul?ExoI酶0.375ul，ddH₂O?3.875ul。

(3)測序反應體系：25％BigDye?mix1ul，3.2uM?DNA測序引物1ul，125mMEDTA溶液1ul，100％乙醇溶液15ul，70％乙醇溶液30ul，HIDI溶液8ul，ddH₂O2ul。

本試劑盒供一人份檢測應用，試劑盒的保存溫度為-20℃。?