[發明專利]一種用于豆粕發酵的益生菌菌劑及其制備方法

無效

• 申請號: 201210083014.5
• 申請日: 2012-03-27
• 公開（公告）號: CN102604871A
• 公開（公告）日: 2012-07-25
• 發明（設計）人: 林新堅;陳濟琛;林戎斌;林陳強;吳大華
• 申請（專利權）人: 福建省農業科學院土壤肥料研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A23L1/20;C12R1/125
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊

技術領域

本發明屬于微生物發酵領域，具體涉及一種用于豆粕發酵的益生菌菌劑及其制備方法。

發明背景

隨著飼料工業發展和生產高度集約化，對優質飼料蛋白的需求日趨增大，由于動物蛋白需求的膨脹和來源的快速減少，促使人們選用低價低廉、來源可靠的植物蛋白來替代之。豆粕因具有蛋白質含量高、氨基酸組成平衡、供應量充足、價格適宜等優點而成為最好的選擇。但豆粕也有含多種抗營養因子、蛋白質消化率低、有豆腥味適口性差等缺陷。

發明內容

為了克服上述缺陷，本發明一種用于豆粕發酵的益生菌菌劑及其制備方法，該方法可降低發酵成本，提高生物量，制得具有發酵降解豆粕功能的益生菌菌劑。

本發明首先提供了一種所述用于豆粕發酵的益生菌菌劑的制備方法，其具體步驟包括：

（1）枯草芽孢桿菌液體發酵培養基

按重量百分數計為，黃豆粉或豆粕0.5-5%、糖蜜0.5-5%、檸檬酸鈉0.05-0.5%、NaCl0.05-0.5%，余量為水；pH5-9；在121℃下高壓滅菌30min；

（2）枯草芽孢桿菌種子液制備

將枯草芽孢桿菌菌株活化后接種到細菌液體發酵培養基中，置于25-40℃、100-200r/min條件下震蕩發酵10-50h，制得枯草芽孢桿菌種子液；所述細菌液體發酵培養基為牛肉膏-蛋白胨液體培養基；

（3）枯草芽孢桿菌發酵罐發酵

將枯草芽孢桿菌種子液接種到枯草芽孢桿菌液體發酵培養基中，接種量1-20%（體積），在溫度20-45℃下于發酵罐中發酵10-50h；

（4）發酵完成后收集發酵液，進一步加工為液體或固體的益生菌菌劑。

???其中所述黃豆粉或豆粕預先過60目篩。

步驟（2）所述的活化在細菌培養斜面上活化，活化時間10-48h；細菌培養斜面的固體培養基配制如下：牛肉膏0.5?%，NaCl?0.5%，蛋白胨1%，瓊脂2%，pH?7.2。

更優選地，所述枯草芽孢桿菌液體發酵培養基，按重量百分數計為，黃豆粉或豆粕1-5%、糖蜜1-5%、檸檬酸鈉0.05-0.1%、NaCl?0.3-0.5%，余量為水；pH6.5-7.5；在121℃下高壓滅菌30min。

更優選地，步驟（3）的發酵條件為：接種量5-20%（體積），在溫度30-35℃下于發酵罐中發酵15-50h。

步驟（3）中控制發酵罐中溶氧量為10-50%。

步驟（4）中將收集的發酵液直接瓶裝或袋裝成液體的益生菌菌劑；或將發酵液用沸石吸附后袋裝成固體的益生菌菌劑。

本發明另外提供了由上述制備方法制得的益生菌菌劑。

本發明還提供了所述的益生菌菌劑在豆粕發酵中的應用。

本發明將枯草芽孢桿菌（Bacillus?subtilis）作為益生菌制成菌劑發酵豆粕，降解豆粕中的大分子蛋白，生成具高營養價值的小肽和游離氨基酸，大大提高蛋白質的消化率和轉化率，還可以消除豆粕中各種抗營養因子，提高豆粕飼料的利用率。另外，微生物發酵過程中可能產生的各種生物活性物質，如益生素、有機酸、抗菌素、異黃酮等，較大程度上改善了適口性，對動物具有一定的保健功能。

本發明的顯著優點：

1、常見枯草芽孢桿菌液體發酵所用的培養基大多以牛肉膏、蛋白胨、葡萄糖等為主，生產成本較高，本發明選用的發酵培養基的主要成分為黃豆粉（或豆粕）、糖蜜，分別為農產品和工業制糖廢棄物，容易獲得且價格便宜，成本低；

2、發酵后的每毫升發酵液中的生物量達到100億左右，可用于降解豆粕中的大分子蛋白，生成具高營養價值的小肽和游離氨基酸，大大提高蛋白質的消化率和轉化率，還可以消除豆粕中各種抗營養因子，提高豆粕飼料的利用率，具有較好的應用價值。

3、本發明的制備方法可降低發酵成本，簡化生產環節，提高效率。

具體實施方式

以下為本發明的幾個具體實施案例，進一步描述本發明，但是本發明不僅限于此。其中采用的菌株CS27、CS21均出自文獻“李善仁等，三株芽孢桿菌作為益生菌的生物特性，營養學報，2010年第32卷第1期”。

實施例1

1、枯草芽孢桿菌發酵培養基制備

將10g糖蜜，50g黃豆粉，1g檸檬酸鈉，5g氯化鈉投入水中攪拌均勻，并用水定容至1L，調至pH7.5，在121℃下高壓滅菌30min。

2、枯草芽孢桿菌種子液制備