[發明專利]一種樹上干杏的多倍體誘導方法

無效

• 申請號: 201210081869.4
• 申請日: 2012-03-26
• 公開（公告）號: CN102524083A
• 公開（公告）日: 2012-07-04
• 發明（設計）人: 劉敏;王曉軍;寧慧霞;王卉;努爾波拉提;周黎
• 申請（專利權）人: 中國科學院新疆理化技術研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 烏魯木齊中科新興專利事務所 65106
• 代理人: 張莉

技術領域

本發明涉及植物組織培養領域，具體涉及新疆樹上干杏多倍體的誘導方法。

背景技術

樹上干杏(俗稱吊死干、花干杏)，屬薔薇科(Rosaeeae)、李亞科(Prunoideae)、杏屬(Prunus)，是我國天山北麓特克斯河谷和伊犁河谷特有的杏資源，因其果實成熟后不落地、直接在樹上風干而得名。樹上干杏無論是干果還是鮮果品味都極好，其核殼極薄，輕磕即破，果仁香甜可口，實為風沙地區的無價之寶，具有很高的經濟價值。就杏本身來看，杏樹全身是寶，幾乎每一處都能為人所用。杏果肉不僅香甜可口而且營養豐富。杏果肉中除了含有蛋白質、纖維、各種糖、有機酸和礦物質外，還有豐富的維生素。杏仁也含有豐富的營養。杏仁除了食用還可入藥，能止咳祛痰、潤肺止瀉，治風寒肺病、驚癇頭痛、慢性氣管炎等疾病，早在《本草綱目》中就有記載。另外，杏仁油既是高級潤滑油，又可護膚化妝品的原料。杏核殼可提取栲膠，可制作活性炭；杏葉可作牛羊的飼料；杏的樹皮可提取單寧和杏膠；枝干可加工成木炭和繪畫用的炭條、炭黑等；杏木是做家具的上好材料。杏的加工制品是我國傳統的出口創匯產品，為我國創取大量外匯。另外，杏樹特有的抗寒抗旱耐貧瘠的品質，使它既能防風固沙，又能防止水土流失。在“三北防護林”體現中，杏樹被認為是最適宜的經濟林樹種之一，其生態效益越來越受到社會的重視。

多倍體遺傳適應性較強，在競爭中勝過它們的二倍體祖先。多倍體的適應性，突出的表現是具有較強的抗寒性、抗熱性、抗旱性，以及對不良土壤條件也有較強的適應性。多倍體育種包括兩大途徑，即自然多倍體的發掘與人工誘導。由于自然多倍體的數量是有限的，不可能達到多倍體育種中所需要的具有豐富遺傳背景的大量群體，因此多倍體的育種主要通過人工誘導這一途徑。植物多倍化后能引起廣泛的變異，產生新的品種，在農業上具有廣泛的應用前景。用于藥材生產可提高有效成分含量；用于林木生產可達到速生，增強抗性的目的；用于蔬菜水果上可使果實變大；用于園藝作物上可形成無籽果實。樹上干杏的果實較一般的杏品種小且產量易受天氣的影響，御寒能力差，因此期望能利于多倍體誘導技術改善樹上干杏的抗寒能力差以及果實小的特點，得到具有果實大，含糖量高，適應性強且抗性強的杏品種，進一步提高其市場競爭力，開拓新的市場，這對擴大新疆林果業種植面積，提高果農經濟收入來說具有重要意義。

發明內容

本發明的目的在于，提供一種樹上干杏的多倍體誘導方法，該方法由新疆樹上干杏無菌種子出芽、繼代兩次、秋水仙素誘導、染色體鑒定、流式細胞儀的分析、生根、溫室煉苗七個步驟完成。通過本發明所述的方法可以有效的誘導和篩選出樹上干杏多倍體，有助于克服樹上干杏在長期種植中出現的品種退化問題，進一步提高其市場競爭力。

本發明所述的一種樹上干杏多倍體誘導方法，按下列步驟進行：

a、將樹上干杏種去除種皮后用100mg/L赤霉素溶液浸泡24h，再用清水浸泡24h進行預處理，然后用清水沖洗5min，在超凈工作臺上，用濃度為75％乙醇時間30s，0.1％HgCl₂時間1min，15％H₂O₂時間20min依次進行消毒，再用無菌水沖洗6次，然后置于滅菌的濾紙上，待水分晾干接種于MS固體培養基上培養并置于培養室，培養室溫度為20℃±1℃，光照時間16h/d，光照強度2000lx，進行30天的無菌培養；

b、將步驟a培養的杏無菌種子苗，長到1-2厘米切下，接種到固體培養基QL’+0.1-0.8mg/L6-BA+0.01-0.08mg/LIBA+30mg/L蔗糖+瓊脂7g/L中，pH5.88，進行18-25天叢芽繼代培養兩次；

c、將步驟b中的叢芽繼代培養的單苗接種于含有0.2％-0.8％的秋水仙素固體培養基QL’+0.1-0.8mg/L6-BA+0.01-0.08mg/LIBA+30mg/L蔗糖+瓊脂4g/L中，pH5.88，培養時間18天，溫度25℃±1℃，光照時間16h/d，光照強度3000lx進行誘導兩次，然后對誘導新葉芽分別按常規方法進行染色體檢測和流式細胞儀測試，以確定誘導苗的倍性；

d、將步驟c誘導苗接入固體培養基1/2DKW+0.1-0.8mg/LIBA進行生根，在溫度25℃±1℃暗培養12d；

e、將步驟d生根的單苗，逐一從培養基中輕輕取出，洗去根部所帶的瓊脂，移入含有0.1-0.8mg/LIBA溶液中浸泡4小時后移栽到草炭土中進行溫室煉苗，經過20天組培苗長出新葉。