[發明專利]一種利用家蠶生物反應器生產豬瘟病毒亞單位疫苗的方法無效
| 申請號： | 201210080028.1 | 申請日： | 2012-03-23 |
| 公開（公告）號： | CN103319573A | 公開（公告）日： | 2013-09-25 |
| 發明（設計）人： | 張許科;孫進忠;白朝勇 | 申請（專利權）人： | 普萊柯生物工程股份有限公司 |
| 主分類號： | C07K14/18 | 分類號： | C07K14/18;C12N15/866;A01K67/04;A61K39/187;A61P31/14;G01N33/68 |
| 代理公司： | 北京華夏正合知識產權代理事務所(普通合伙) 11017 | 代理人： | 韓登營 |
| 地址： | 471000 *** | 國省代碼： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 利用 家蠶 生物反應器 生產 豬瘟 病毒 單位 疫苗 方法 | ||
1.一種豬瘟病毒重組E2蛋白，其特征在于，所述豬瘟病毒重組E2蛋白具有與SEQ?ID?NO1.序列至少70％同源性的序列。
2.根據權利要求1所述的豬瘟病毒重組E2蛋白，其特征在于，所述豬瘟病毒重組E2蛋白的序列為SEQ?ID?NO1.序列。
3.一種豬瘟病毒重組E2蛋白，其特征在于，所述豬瘟病毒重組E2蛋白具有與SEQ?ID?NO2.序列至少70％同源性的序列。
4.根據權利要求1所述的豬瘟病毒重組E2蛋白，其特征在于，所述豬瘟病毒重組E2蛋白的序列為SEQ?ID?NO2.序列。
5.一種利用家蠶生物反應器生產豬瘟病毒重組E2蛋白的方法，其特征在于，包括以下步驟：
1)克隆豬瘟病毒重組E2蛋白的編碼基因序列，至昆蟲核型多角體病毒(AcNPV)的表達轉移載體pFastBacI上，獲得重組表達轉移載體；
2)將重組表達轉移載體轉化入含有桿狀病毒載體的大腸桿菌感受態細胞DH10Bac中，獲得含有豬瘟病毒E2基因的重組桿狀病毒基因組穿梭載體；
3)將上述重組桿狀病毒基因組穿梭載體轉染入昆蟲細胞中，獲得帶該豬瘟病毒E2基因的重組昆蟲核型多角體病毒；
4)將上述重組昆蟲核型多角體病毒經皮下注射家蠶幼蟲或蛹，在體內表達豬瘟病毒重組E2蛋白。
6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述豬瘟病毒重組E2蛋白的編碼基因序列為具有與SEQ?ID?NO.3至少70％同源性的序列。
7.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述豬瘟病毒重組E2蛋白的編碼基因序列為SEQ?ID?NO.3序列。
8.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述豬瘟病毒重組E2蛋白的編碼基因序列為與SEQ?ID?NO.4至少70％同源性的序列。
9.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述豬瘟病毒重組E2蛋白的編碼基因序列為SEQ?ID?NO.4序列。
10.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述家蠶幼蟲或蛹的品種為大造。
11.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述昆蟲細胞為sf9、sf21、High?Five等昆蟲細胞。
12.一種由權利要求1-4任意一種所述的豬瘟病毒重組E2蛋白制備的豬瘟病毒亞單位疫苗。
13.一種豬瘟病毒亞單位疫苗的制備方法，其特征在于，使用權利要求1-4任意一種所述的豬瘟病毒重組E2蛋白，加入疫苗佐劑，獲得豬瘟病毒亞單位疫苗。
14.一種如權利要求1-4任意一種所述的豬瘟病毒重組E2蛋白在制備治療或預防豬瘟的抗原中的應用。
15.一種如權利要求1-4任意一種所述的豬瘟病毒重組E2蛋白在制備豬瘟診斷試劑中的應用。
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