[發明專利]一種用于全基因組或跨基因組沉默的長雙鏈RNA表達載體有效
| 申請號： | 201210080027.7 | 申請日： | 2012-03-23 |
| 公開（公告）號： | CN103320462A | 公開（公告）日： | 2013-09-25 |
| 發明（設計）人： | 劉培;李天驕;唐秀文 | 申請（專利權）人： | 中國農業大學 |
| 主分類號： | C12N15/82 | 分類號： | C12N15/82;A01H5/00 |
| 代理公司： | 北京路浩知識產權代理有限公司 11002 | 代理人： | 王朋飛;王加嶺 |
| 地址： | 100193 *** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 用于 基因組 沉默 長雙鏈 rna 表達 載體 | ||
1.一種用于全基因組或跨基因組沉默的長雙鏈RNA表達載體，其特征在于，其為整合有以下序列的植物雙元表達載體：終止子-啟動子-LoxP位點序列-attP1位點序列-ccdB基因-CmR基因-attP2位點序列-LoxP位點序列-啟動子-終止子。
2.根據權利要求1所述的表達載體，其特征在于，所述終止子為NOS終止子。
3.根據權利要求1所述的表達載體，其特征在于，所述啟動子為CaMV35S啟動子。
4.一種用于全基因組或跨基因組沉默的長雙鏈RNA表達載體，其特征在于，其為整合有以下序列的植物雙元表達載體：NOS終止子序列-CaMV35S啟動子-LoxP位點序列-attP1位點序列-ccdB基因-CmR基因-attP2位點序列-LoxP位點序列-CaMV35S啟動子-NOS終止子序列。
5.根據權利要求4所述的表達載體，其特征在于，所述植物雙元表達載體的出發載體為pTF101.1。
6.根據權利要求5所述的表達載體，其特征在于，其堿基序列如Seq?ID?No.1所示。
7.權利要求1-6任一項所述的表達載體在發掘新的基因功能或培育抗病蟲植物新品種中的應用，其是利用該表達載體T-DNA邊界序列間共軛的啟動子序列及LoxP和attP位點序列，通過酶切反應或重組反應將植物或病蟲cDNA文庫整合至該載體，通過RNA干涉在植物中沉默植物基因或通過寄主輸出來沉默病蟲害基因，從而應用于植物功能基因組研究來發掘新的基因功能，或篩選可用于寄主輸出的RNA干涉的靶標基因，進而培育出廣譜或專一的抗病蟲植物新品種。
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