[發明專利]一種大豆皂苷的提取純化方法

有效

• 申請號: 201210077469.6
• 申請日: 2012-03-22
• 公開（公告）號: CN103319563A
• 公開（公告）日: 2013-09-25
• 發明（設計）人: 江連洲;李楊;劉珊;齊寶坤;孫樹坤
• 申請（專利權）人: 東北農業大學
• 主分類號: C07J63/00
• 分類號: C07J63/00;C07H15/256;C07H1/08
• 代理公司: 北京科龍寰宇知識產權代理有限責任公司 11139
• 代理人: 孫皓晨

技術領域

本發明涉及一種植物中功能性物質的提取純化方法，尤其涉及大豆皂苷的提取與純化。屬于功能因子的分離純化領域。

背景技術

大豆作為豆科植物大豆的成熟種子，是許多國家和地區的主要食物品種之一。而我國則是最早把大豆用作食物的國家，公元前2838年《神農本草經》首次記載了大豆及其保健價值。隨著大豆營養和生理功能研究的不斷發展，大豆食品作為一種健康食品越來越受到人們的青睞。流行病學調查發現，長期食用大豆的東南亞人群中，癌癥、心血管等疾病的發生率明顯低于西方。1999年10月，美國食品藥物管理局(FDA)極為罕見地宣布了關于確認源自東方的黃豆能減少冠心病風險的正式“健康聲明”。近年來研究發現，大豆中含有的某種生物活性物質具有預防各種癌癥，尤其是乳腺癌、直腸癌等，提高免疫力，降低膽固醇，抗氧化，抗動脈粥樣硬化、改善婦女更年期綜合征等多種保健功效。研究提示，這些具有多種保健功效的生物活性物質可能與大豆中含有的大豆異黃酮、大豆皂苷密切相關。在早期的研究中表明，這些保健功效是大豆異黃酮起著主要的作用，隨著研究的進行和發展，近幾年的研究表明了，這些功能不僅與大豆異黃酮相關，同時與大豆中的大豆皂苷等物質的協同作用或媒介作用相關。另外，大豆皂苷本身就具有很多對生理功能有益的作用。大豆皂苷具有降脂減肥，抗凝血、抗血栓、抗糖尿病，抗氧化、抗自由基、降低過氧化脂質，抗病毒，抗癌，抗肝損傷，抗衰老，免疫增強等作用，具有很高的應用價值。可是在實際的生產中，大豆皂苷大多留在了副產物中，被廢棄了或是做成了動物飼料，并沒有進入到人們的飲食中，這是一種極大的浪費。

皂苷(saponin)又名皂素、皂草甙，是甾族或三萜系化合物的低聚配糖體的總稱。因其水溶液能形成持久泡沫，像肥皂一樣而得名。在自然界中分布很廣。目前人們已經在100多種植物如人參、大豆、甘草、黃芪等和一些海洋生物如海參中發現了皂苷。大豆皂苷(soyasaponins)，也稱大豆皂甙，屬于三萜類齊墩果酸型皂苷，是三萜類同系物的羥基和糖分子環狀半縮醛上的羥基失水縮合而成。它可以水解生成多種糖類和配糖體。大豆皂苷按目前流行的觀點來看可分為A組大豆皂苷，B組大豆皂苷，E組大豆皂苷和DDMP組大豆皂苷。

大豆中大豆皂苷的含量很低，脫脂大豆中皂苷的含量僅為0.5％，豆渣中皂苷的含量僅約為1％。而大豆皂苷做為最難提取的物質之一，在這種含量少得情況下，從大豆中提取大豆皂苷就更為困難了，因此研究大豆皂苷提取方法就顯得尤為重要。

目前對大豆皂苷結構、組織分布及其生理活性已經開展了一些工作。但是對皂苷提取方法的研究顯得不足，現有的研究幾乎都是以有機溶劑提取為主，有機溶劑提取大豆皂苷的優點是方法成熟，但缺點是溶劑用量過大。Hosny和Rosazza從大豆糖蜜中分離出了皂苷I、皂苷A2和一種新的皂苷IV。Dobbins等采用合適濃度的丙酮水溶液將大豆糖蜜中的皂苷等成分提取出來，過濾除去不溶物后，將上清液的溫度降低到10℃以下結晶的辦法從大豆糖蜜中分離出大豆皂苷。Liu等通過乙醇提取，乙醚重結晶的方法提取了大豆皂苷。Arichi等通過正丁醇萃取后，將正丁醇相濃縮至干后溶于甲醇并注射到石油醚中重結晶的方法分離得到了大豆皂苷。現有的大豆皂苷的提取方法可以總結為，有機溶劑提取、索氏提取法、微波和超聲結合溶劑提取，樹脂吸附提取。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是克服現有技術的不足，并對現有技術進行了優化，從而提出了一種能夠提高大豆皂苷提取率的一種大豆皂苷的提取純化方法。

本發明所要解決的技術問題是通過以下技術方案來實現的：

本發明的一種大豆皂苷的提取純化方法，其特征在于包括以下步驟：

(1)大豆片擠壓膨化之后，利用醇酶法提取大豆油脂和大豆蛋白；收集所得到的副產物作為原料，包括大豆豆渣和對乳狀液進行破乳后回收的乙醇混合溶液；

(2)將破乳后回收的乙醇混合溶液和豆渣混合，利用超聲波細胞粉碎機進行超聲提取，離心分離；

(3)將離心所得的上清液進行旋轉蒸發成膏狀之后，凍干成粉末備用；

(4)稱取凍干的粉末，溶解于無水乙醇中，利用大孔吸附樹脂柱色譜對樣品進行純化；

(5)將洗脫液旋轉蒸發成膏狀之后凍干成粉末，即得。

其中，所述的醇酶法提取大豆油脂和大豆蛋白的方法，已記載在申請號為201110136360.0，發明名稱為“同步提取大豆油脂和濃縮蛋白的方法”的專利申請中。