[發(fā)明專利]一種燕麥肽的酶法提取方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210077339.2
• 申請日: 2012-03-22
• 公開（公告）號: CN102605030A
• 公開（公告）日: 2012-07-25
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 郁磊;陶丁偉;鄒聯(lián)
• 申請（專利權(quán)）人: 無錫德冠生物科技有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K4/10;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/22;A23L1/305;A61K38/03;A61P9/12
• 代理公司: 無錫市大為專利商標(biāo)事務(wù)所 32104
• 代理人: 時旭丹;劉品超

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種燕麥肽及其提取方法與應(yīng)用，特別涉及一種燕麥肽及其提取方法與其在制備抑制ACE活性和降血壓的食品或藥物中的應(yīng)用。屬于酶法提取燕麥肽技術(shù)領(lǐng)域。?

背景技術(shù)

燕麥，禾本科燕麥屬，一年生或多年生草本植物。燕麥營養(yǎng)價值豐富而全面，其蛋白質(zhì)、脂肪、維生素E、膳食纖維以及鈣、鎂、鐵、磷等礦物元素含量均高于其它谷類作物，具有降血脂、降低膽固醇、降血壓、降血糖和抗氧化性等多種生物活性功能。?

血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(Angiotensin-I-convertingen?enzyme，ACE，EC?3.4.15.1)是一種含鋅二肽羧酶，廣泛分布于哺乳動物組織中并對其血壓調(diào)節(jié)起著關(guān)鍵性的作用。ACE在人體腎素-血管緊張素系統(tǒng)(Renin?angiotensin?system，RAS)和激肽-激肽生成酶系統(tǒng)(Kallikerni-kinin?system，KKS)中，對血壓調(diào)節(jié)起著重要的作用。因此通過抑制體內(nèi)ACE活性來達(dá)到治療高血壓的目的是一條非常重要的途徑。?

近年來，一些具有特定生理活性的短肽，如ACE抑制肽、阿片肽、免疫調(diào)節(jié)肽等引起了人們的極大關(guān)注，這些肽具有安全性高、無副作用、來源廣泛等優(yōu)點。植物蛋白以其不可替代的優(yōu)點成為人們研究活性肽的主要來源。燕麥降壓肽即是從燕麥蛋白中得到的一種活性多肽。燕麥麩皮是燕麥加工過程中的副產(chǎn)物，其中蛋白質(zhì)含量很高，目前國內(nèi)外對燕麥麩皮的研究主要集中在膳食纖維方面，對燕麥麩皮蛋白的利用很少。?

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種燕麥肽的酶法提取方法及其應(yīng)用。?

本發(fā)明的技術(shù)方案：所提供的燕麥肽的酶法提取方法，以燕麥麩皮為原料采用酶法提取燕麥肽，包括如下步驟：?

（1）預(yù)處理：將燕麥麩皮粉碎過60-100目篩，燕麥麩皮與水混合，燕麥麩皮∶水的重量比為1∶10-1∶20，調(diào)節(jié)pH為8.0-9.5，在溫度為50-60℃條件下，進(jìn)行攪拌預(yù)處理，預(yù)處理時間為30-50min；

（2）酶處理：在經(jīng)過步驟（1）預(yù)處理后的液體中加入堿性蛋白酶，堿性蛋白酶的添加量為20-50mL/kg燕麥麩皮，在45-55℃下攪拌處理2-5小時；

然后，加入風(fēng)味蛋白酶，風(fēng)味蛋白酶的添加量為50-70mL/Kg燕麥麩皮，在50-60℃下攪拌處理1-2小時；

（3）純化：將步驟（2）酶處理后的液體離心取上清液，在上清液中加入β-葡聚糖酶和真菌淀粉酶反應(yīng)2-4小時，β-葡聚糖酶的用量為30-50mL/Kg燕麥麩皮，真菌淀粉酶的用量為60-80ml/Kg燕麥麩皮，過濾得到澄清液體；將所述澄清液體加入到以CBE313ADS17大孔吸附樹脂為填料的吸附柱中，然后用去離子水沖洗至洗脫液中沒有糖分和鹽分，最后用體積濃度60%-75%乙醇溶液洗脫，得到含燕麥肽的溶液；

（4）制干粉：將含燕麥肽溶液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至一半體積，噴射干燥得到燕麥肽干粉。

所述步驟（2）中，所述堿性蛋白酶的添加量優(yōu)選為40mL/Kg燕麥麩皮；所述風(fēng)味蛋白酶的添加量優(yōu)選為60mL/Kg燕麥麩皮。所述堿性蛋白酶和所述風(fēng)味蛋白酶為諾維信公司產(chǎn)品。?

所述步驟（3）中，所述過濾得到澄清液體，過濾的濾徑為0.5-0.8μm。?

所述步驟（3）中，所述澄清液體優(yōu)選按照CBE313ADS17大孔吸附樹脂的2倍體積加入到吸附柱中；所述乙醇溶液洗脫的體積優(yōu)選為吸附柱體積的2倍。?

用所述方法制備的燕麥肽的應(yīng)用，其在制備抑制ACE活性和降血壓的食品或藥物中的應(yīng)用。?

本發(fā)明的有益效果：本發(fā)明的方法將燕麥麩皮用酶法降解燕麥麩皮蛋白成為燕麥肽，通過板框過濾、樹脂吸附等手段將其分離提純，所得燕麥肽89%的分子量在1500Da以下，具有抑制ACE的活性，可以廣泛應(yīng)用于降壓保健食品或制備降壓藥物等領(lǐng)域。?

具體實施方式

下面結(jié)合具體實例對本發(fā)明做詳細(xì)說明。下述實施例中的實驗方法，如無特殊說明，均為常規(guī)方法。?

實施例1、燕麥肽的制備?

一、燕麥肽的制備

具體步驟如下：

1、燕麥麩皮預(yù)處理：

燕麥麩皮粉碎至60-100目，凱氏定氮法測定其中蛋白含量可達(dá)25%。將80g步驟1所述60-100目的燕麥麩皮與去離子水按重量比1∶10混合，調(diào)pH值到9.0，在55℃水浴中攪拌處理時間為40min。

2、酶處理：?