[發明專利]一種植物油中植物甾醇的檢測方法

無效

• 申請號: 201210075758.2
• 申請日: 2012-03-21
• 公開（公告）號: CN102636583A
• 公開（公告）日: 2012-08-15
• 發明（設計）人: 王月華;王萍;王洪堯
• 申請（專利權）人: 山東三星玉米產業科技有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 濟南舜源專利事務所有限公司 37205
• 代理人: 宋玉霞

1.一種植物油中植物甾醇的檢測方法，其步驟如下：（1）樣品的處理：首先稱取0.1g～1g樣品放于皂化瓶中，然后在皂化瓶中加入30mL～50mL質量分數為60%?的KOH水溶液和70mL～100mL的無水乙醇（分析純），搖勻，最后加入3～4顆沸石；（2）樣品的皂化：待步驟（1）完成后，將皂化瓶接于回流冷凝管上，在溫度為90℃～100℃的條件下進行皂化，皂化時間為2h～3h；（3）提取皂化物：待步驟（2）皂化完成后，用30mL～50mL的無水乙醚（分析純）提取劑提取皂化瓶中與沸石上的皂化物，將提取液轉入分液漏斗Ⅰ中，靜置待提取液分層后上層液體留于分液漏斗Ⅰ中，將下層液體移入分液漏斗Ⅱ中，然后在分液漏斗Ⅱ中加入無水乙醚（分析純）進行反復提取3～4次，靜置分層后將分液漏斗Ⅱ中的上層液體與分液漏斗Ⅰ的上層液體合并，得到最終的乙醚提取液；（4）乙醚提取液的處理:用30?mL～50mL質量分數為3%的NaCL水溶液反復清洗步驟（3）所得的乙醚提取液，振蕩分層，棄去下層液體，重復清洗直到棄去的下層液體呈中性，得到的上層液體即為所需提取物；（5）提取物的處理：將步驟（4）中所得的提取物通過盛有5g無水硫酸鈉的過濾器進行過濾，將所得的濾液置于旋轉蒸發器的圓底蒸發瓶中，然后將圓底蒸發瓶連接蒸發儀器進行提取劑無水乙醚的蒸發，待無水乙醚完全蒸發后，得到所需植物甾醇，取下圓底蒸發瓶用純乙醇多次清洗溶解圓底蒸發瓶中的植物甾醇，然后轉入到100mL容量瓶中用純乙醇定容，最后經0.45um的微孔濾膜過濾于25mL容量瓶中，試樣的制備完成；（6）試樣的測試：用進樣針吸取步驟（5）所得的試樣18?uL～22uL，在進樣溫度為40℃～50℃，波長為200?nm?～250nm,流速為0.5?mL/min～1.2mL/min的條件下采用高效液相色譜儀得到色譜圖，然后利用外標法將色譜圖中各甾醇的峰面積與相對應甾醇的標準曲線對照得出試樣中各甾醇的濃度。

2.根據權利要求1所述的植物油中植物甾醇的檢測方法，其特征在于，所述步驟（6）中高效液相色譜外標法的標準曲線制備步驟如下：用進樣針分別吸取濃度為1mg/ml、0.8mg/ml、0.6mg/ml、?0.4mg/ml、0.2?mg/ml、0?mg/ml的對照品溶液18?uL～22uL，依照步驟（6）所選定的進樣條件進樣溫度40℃～50℃，波長200?nm?～250nm,流速0.5?mL/min～1.2mL/min，測定各濃度下的峰面積值，以進樣溶液濃度為縱坐標，相應的峰面積為橫坐標，繪制得標準曲線。