[發明專利]利用SCAR標記鑒定甘蔗抗褐銹病性方法

無效

• 申請號: 201210070465.5
• 申請日: 2012-03-17
• 公開（公告）號: CN102586460A
• 公開（公告）日: 2012-07-18
• 發明（設計）人: 闕友雄;許莉萍;黃寧;陳如凱
• 申請（專利權）人: 福建農林大學
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊

1.????一種利用SCAR標記鑒定甘蔗抗褐銹病性的方法，包括基因組DNA的提取、SCAR-PCR標記的檢測體系建立和SCAR-PCR產物的檢測，其特征在于：

（1）SCAR-PCR標記的檢測：使用的檢測引物是甘蔗SCAR-A和SCAR-B，其中，SCAR-A

是5'-ACTCGGTGTCCTAGTTGTGT-3′，SCAR-B是5'-GGACTCGGTATAGGACATCA-3'；???

（2）SCAR-PCR標記的檢測建立：SCAR-PCR擴增體系為總體積25?μl，內含2.5?μl?10×PCR緩沖液，2.5?μl?25?mmol/L?MgCl₂，0.5?μl?10?mmol/L?dNTP，10?mmol/L?的檢測引物SCAR-A和SCAR-B各1.0?μl，1.25?U?Taq?DNA?Polymerase，20-50?ng基因組DNA，ddH₂O補足到25?μl；SCAR-PCR擴增程序如下：94?℃?4?min；94?℃?1?min，56?℃?1?min，72?℃?2?min，30個循環；72?℃10?min；所述10×PCR緩沖液組成成分為100?mmol/L?pH8.5?Tris-HCl，500?mmol/L?KCl和15?mmol/L?MgCl₂；

????（3）SCAR-PCR產物的檢測：電泳檢測的SCAR-PCR擴增圖譜中，在分子量為680?bp的位置出現DNA條帶，為甘蔗抗褐銹病的標志。