[發明專利]一種液相色譜-串聯質譜法檢測卷煙濾嘴中四種主要芳香胺的方法

有效

• 申請號: 201210070391.5
• 申請日: 2012-03-17
• 公開（公告）號: CN102608233A
• 公開（公告）日: 2012-07-25
• 發明（設計）人: 余晶晶;王昇;蔡君蘭;彭斌;張曉兵;謝復煒;王宜鵬;楊松
• 申請（專利權）人: 中國煙草總公司鄭州煙草研究院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/14
• 代理公司: 鄭州中民專利代理有限公司 41110
• 代理人: 姜振東

?技術領域

本發明屬于卷煙濾嘴對主流煙氣中有害成分截留量的研究，具體涉及一種液相色譜-串聯質譜法檢測卷煙濾嘴中四種主要芳香胺的方法。

?背景技術

芳香胺及其衍生物具有誘變因子,可以通過吸入、食入或透過皮膚吸收而導致中毒，能通過形成高鐵血紅蛋白，造成人體血液系統損害，也可直接作用于肝細胞，引起中毒性肝損害。其中一些芳香胺衍生物還具有致癌和致突變的作用，即使是在低濃度下，對動物和人體都具有致癌活性。Hoffmann名單中包含有四種芳香胺化合物，即1-氨基萘、2-氨基萘、3-氨基聯苯、4-氨基聯苯。其中，2-氨基萘、4-氨基聯苯被國際癌癥研究機構（IARC）列為1類人類致癌物。濾嘴作為抽煙者與主流煙氣之間的橋梁，可以有效地濾除主流煙氣中的部分有害成分。直接分析濾嘴中芳香胺化合物對于研究濾嘴對卷煙主流煙氣有害成分的濾除作用具有十分重要的意義。

已有文獻報道采用固相萃取-氣相色譜/質譜法（GC-MS）同時測定卷煙濾嘴中的四種芳香胺。采用鹽酸溶液超聲萃取后，經二氯甲烷洗滌、氫氧化鈉中和、二氯甲烷萃取后，采用無水硫酸鈉干燥，然后使用五氟丙酸酐進行衍生化，所得溶液采用固相萃取柱純化，濃縮后通過氣相色譜-質譜聯用儀（GC-MS）定量測定芳香胺的含量。此方法樣品前處理方法十分繁瑣，耗時長，不利于分析效率的提高。因此，建立一種快速、靈敏的檢測卷煙濾嘴中四種主要芳香胺截留量的檢測方法十分必要。

?發明內容

本發明的目的正是針對現有技術中四種主要芳香胺化合物的測定方法前處理繁瑣費時的問題，而提供一種液相色譜-串聯質譜法檢測卷煙濾嘴中芳香胺截留量的方法。

本發明的目的是通過以下方式技術方案來實現的：本發明的檢測方法采用5%HCl溶液超聲萃取濾嘴中的芳香胺類化合物，經陽離子交換固相萃取柱純化處理，采用液相色譜-串聯質譜聯用儀（LC-MS?/MS）實現卷煙濾嘴中四種芳香胺的測定，其具體步驟如下：

a、卷煙濾嘴中四種主要芳香胺的萃取與凈化：將抽吸完的濾嘴剪開成4等分，置于具塞錐形瓶中，加入5%HCl溶液和氘代內標溶液，超聲萃取，萃取溶液離心，取上清液上樣到經甲醇活化的陽離子交換固相萃取柱上，經水、甲醇洗滌后，采用含5%氨水的甲醇溶液洗脫，洗脫液混勻后進LC-MS/MS分析；

b、樣品的分析：

LC-MS/MS分析所用色譜柱為Waters?C18（100?mm×2.1mm?i.d.,?2.7?μm），柱溫：30?℃；流動相A為含0.1%甲酸的水溶液，流動相B為含0.1%甲酸的乙腈溶液；采用75%A25%B等度洗脫，流速200?μL?/min；進樣體積10?μL；

離子源：電噴霧電離源（ESI）；掃描方式：正離子掃描；檢測方式：多反應監測MRM；電噴霧電壓：5500V；氣簾氣壓力：30?psi；輔助氣1壓力：70?psi；輔助氣2壓力：70?psi；離子源溫度：500?℃。各化合物的定量離子對、定性離子對、駐留時間、碰撞能量（CE）及去簇電壓（DP）參見表1。

表1：各化合物的定量離子對、定性離子對、駐留時間、碰撞能量及去簇電壓

在本發明中，步驟a中所述的卷煙濾嘴為10支；步驟a中所述的5%HCl溶液的用量為50?mL；步驟a中所述的氘代內標為D7-1-氨基萘、D9-4-氨基聯苯；步驟a中所述的超聲萃取時間為30?min；步驟a中陽離子交換固相萃取柱為Waters?Oasis?MCX（150mg，6mL）小柱；步驟a中離心機轉速為6000轉，離心時間為5?min；步驟a中取部分溶液上樣到陽離子交換柱上，部分溶液為25mL；步驟a中活化、洗滌固相萃取柱所用的甲醇和水體積均為10?mL；步驟a中采用含5%氨水的甲醇溶液洗脫，洗脫體積為5?mL。

本發明中所述收集容器為100?mL的具塞磨口錐形瓶。

本發明在卷煙抽吸采用直線吸煙機按照YC/T29-1996規定的標準條件抽吸，每次實驗抽吸10支卷煙。