[發(fā)明專利]一種新型的超高分辨光電融合顯微成像系統(tǒng)

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210069941.1
• 申請(qǐng)日: 2012-03-16
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103308496A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-09-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 徐濤;羅志勇;紀(jì)偉;倉(cāng)懷興;孟濤;張翔;季剛;付彥輝;賈策
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 徐濤;羅志勇;紀(jì)偉
• 主分類(lèi)號(hào): G01N21/64
• 分類(lèi)號(hào): G01N21/64;G02B21/36;G02B21/06
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.一種高分辨熒光顯微鏡和掃描電鏡結(jié)合的光電融合熒光顯微成像系統(tǒng)。其特征在于，該光電融合顯微成像系統(tǒng)包括：熒光顯微鏡系統(tǒng)、樣品轉(zhuǎn)移系統(tǒng)、樣品切片系統(tǒng)和掃描電鏡系統(tǒng)，其中：

熒光顯微鏡系統(tǒng)：用于激發(fā)樣品熒光，獲取高分辨率的熒光圖像，獲得被探測(cè)分子的精確定位。

樣品轉(zhuǎn)移系統(tǒng)：用于樣品在熒光顯微鏡系統(tǒng)和掃描電鏡系統(tǒng)之間轉(zhuǎn)移，實(shí)現(xiàn)高分辨率熒光成像和掃描電子成像。

樣品切片系統(tǒng)：對(duì)樣品進(jìn)行超薄切片，使電鏡和熒光顯微鏡能對(duì)樣品內(nèi)部成像，獲得樣品的三維圖像信息。

掃描電鏡系統(tǒng)：用于進(jìn)行樣品掃描電子成像，獲取樣品的結(jié)構(gòu)信息。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的光電融合顯微成像系統(tǒng)，其特征在于：熒光顯微鏡系統(tǒng)主體部分、樣品切片系統(tǒng)位于掃描電鏡樣品室，三者在計(jì)算機(jī)的控制下有序工作。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的熒光顯微鏡系統(tǒng)，其特征在于：所述的熒光顯微鏡系統(tǒng)可以是光激活定位顯微鏡(photoactivated?localization?microscopy)，或者是隨機(jī)光學(xué)重構(gòu)顯微鏡(stochastic?optical?reconstruction?microscopy)，或者是雙光子激發(fā)熒光顯微鏡，或者是共聚焦熒光顯微鏡，或者是全內(nèi)反射熒光顯微鏡，或者是受激發(fā)射損耗顯微鏡(stimulated?emission?depletion)，或者是飽和結(jié)構(gòu)照明顯微鏡(saturated?structure?illumination?microscopy)等超高分辨熒光顯微技術(shù)。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的熒光顯微鏡系統(tǒng)，其特征在于：所述熒光顯微鏡系統(tǒng)包括光源系統(tǒng)、掃描擴(kuò)束系統(tǒng)、熒光成像系統(tǒng)。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的熒光顯微鏡系統(tǒng)，其特征在于：掃描擴(kuò)束系統(tǒng)位于光源系統(tǒng)與熒光成像系統(tǒng)之間，包括掃描器和擴(kuò)束器。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的熒光顯微鏡系統(tǒng)，其特征在于：所述的熒光成像系統(tǒng)包括照明物鏡、成像物鏡和成像設(shè)備。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的熒光顯微鏡系統(tǒng)，其特征在于：所述的照明物鏡，用于激發(fā)樣品產(chǎn)生熒光。

8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的熒光顯微鏡系統(tǒng)，其特征在于：所述的成像物鏡，可以和照明物鏡為同一個(gè)物鏡，也可以是不同的物鏡。

9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的熒光顯微鏡系統(tǒng)，其特征在于：所述的成像物鏡和照明物鏡為不同物鏡時(shí)，成像物鏡和照明物鏡的焦點(diǎn)重合且焦平面相互垂直。

10.根據(jù)權(quán)利要求6所述的熒光顯微鏡系統(tǒng)，其特征在于：所述的成像物鏡，用于收集、放大樣品的熒光圖像。

11.根據(jù)權(quán)利要求6中所述的熒光顯微鏡系統(tǒng)，其特征在于：所述成像設(shè)備用于對(duì)成像物鏡放大了的樣品熒光圖像進(jìn)行成像。

12.根據(jù)權(quán)利要求4至11所述的熒光顯微鏡系統(tǒng)，其特征在于：所述掃描器的光軸、照明物鏡光軸重合或平行。

13.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的熒光顯微鏡系統(tǒng)，其特征在于：所述的熒光顯微鏡系統(tǒng)主要部分、樣品切片系統(tǒng)以及樣品轉(zhuǎn)移系統(tǒng)均位于掃描電鏡樣品倉(cāng)內(nèi)部，樣品通過(guò)樣品轉(zhuǎn)移系統(tǒng)依次在熒光顯微鏡系統(tǒng)和掃描電鏡、樣品切片系統(tǒng)間移動(dòng)，實(shí)現(xiàn)光學(xué)成像、電子成像和樣品切片。

14.根據(jù)權(quán)利要求1所述的樣品轉(zhuǎn)移系統(tǒng)，其特征在于樣品可傾斜移動(dòng)、旋轉(zhuǎn)移動(dòng)或、平動(dòng)或多種移動(dòng)方式的結(jié)合，實(shí)現(xiàn)在熒光顯微鏡系統(tǒng)、掃描電鏡和切片系統(tǒng)間移動(dòng)。

15.根據(jù)權(quán)利要求1所述的光電融合顯微成像系統(tǒng)，其特征在于：所述的樣品切片系統(tǒng)包括鉆石刀切片系統(tǒng)或離子束切片系統(tǒng)。

16.根據(jù)權(quán)利要求1所述的光電融合顯微成像系統(tǒng)，其特征在于：根據(jù)熒光染料的不同、光源的不同、入射光角度的不同，可以方便地構(gòu)成多種熒光顯微鏡-掃描電鏡融合成像系統(tǒng)。