[發明專利]蠟樣芽孢桿菌、阪崎腸桿菌及金黃色葡萄球菌檢測試劑盒及檢測方法

有效

• 申請號: 201210068100.9
• 申請日: 2012-03-15
• 公開（公告）號: CN102747139A
• 公開（公告）日: 2012-10-24
• 發明（設計）人: 吳成貢;盧柳燕;龔劍;田仁鵬;汪再興;黃娟
• 申請（專利權）人: 深圳市生科源技術有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12Q1/14;C12Q1/10;C12Q1/04;C12R1/445;C12R1/085;C12R1/01
• 代理公司: 深圳中一專利商標事務所 44237
• 代理人: 張全文

1.一種蠟樣芽孢桿菌、阪崎腸桿菌及金黃色葡萄球菌檢測試劑盒，包括DNA提取液、PCR反應液，其特征在于，所述PCR反應液包括第一反應液、第二反應液及石蠟，所述第一反應液中包括蠟樣芽孢桿菌第一引物、蠟樣芽孢桿菌第二引物、蠟樣芽孢桿菌探針、阪崎腸桿菌正向引物、阪崎腸桿菌反向引物、阪崎腸桿菌探針、金黃色葡萄球菌第一引物、金黃色葡萄球菌第二引物、金黃色葡萄球菌探針，所述蠟樣芽孢桿菌第一引物序列如SEQ?ID?NO：1所示，蠟樣芽孢桿菌第二引物序列如SEQ?ID?NO：2所示，蠟樣芽孢桿菌探針序列如SEQ?ID?NO：3所示，阪崎腸桿菌正向引物序列如SEQ?ID?NO：4所示，阪崎腸桿菌反向引物序列如SEQ?ID?NO：5所示，阪崎腸桿菌探針序列如SEQ?ID?NO：6所示，金黃色葡萄球菌第一引物序列如SEQ?ID?NO：7所示，金黃色葡萄球菌第二引物序列如SEQ?ID?NO：8所示，金黃色葡萄球菌探針序列如SEQ?ID?NO：9。

2.如權利要求1所述的蠟樣芽孢桿菌、阪崎腸桿菌及金黃色葡萄球菌檢測試劑盒，其特征在于，所述第一反應液和第二反應液通過所述石蠟分隔開。

3.如權利要求2所述的蠟樣芽孢桿菌、阪崎腸桿菌及金黃色葡萄球菌檢測試劑盒，其特征在于，所述第一反應液還包括滅菌超純水、緩沖液、氯化鎂、dNTPs。

4.如權利要求2所述的蠟樣芽孢桿菌、阪崎腸桿菌及金黃色葡萄球菌檢測試劑盒，其特征在于，所述第二反應液包括Taq酶、滅菌超純水及顯色劑。

5.如權利要求3或4所述的蠟樣芽孢桿菌、阪崎腸桿菌及金黃色葡萄球菌檢測試劑盒，其特征在于，所述第一反應液各組分體積為：

6.如權利要求3或4所述的蠟樣芽孢桿菌、阪崎腸桿菌及金黃色葡萄球菌檢測試劑盒，其特征在于，所述第二反應液各組分體積為：

Taq酶?????????0.15～0.3微升/管

顯色劑????????0.01～0.02微升/管

滅菌超純水????1.68～1.84微升/管。

7.一種蠟樣芽孢桿菌、阪崎腸桿菌及金黃色葡萄球菌檢測方法，包括如下步驟：

提供蠟樣芽孢桿菌、阪崎腸桿菌及金黃色葡萄球菌的DNA樣品；

進行熒光定量PCR檢測，所述熒光定量PCR檢測步驟中使用如權利要求1-6任一項所述的蠟樣芽孢桿菌、阪崎腸桿菌及金黃色葡萄球菌檢測試劑盒。

8.如權利要求7所述的蠟樣芽孢桿菌、阪崎腸桿菌及金黃色葡萄球菌檢測方法，其特征在于，所述PCR反應條件為：

50-55℃：2-5min；

94-95℃：2-3min；

94-95℃：5-10S；

55-60℃：40-80S；

40循環。