[發明專利]抗腫瘤化合物及其制備方法與應用

有效

• 申請號: 201210067370.8
• 申請日: 2012-03-14
• 公開（公告）號: CN102617588A
• 公開（公告）日: 2012-08-01
• 發明（設計）人: 張立新;宋福行;陳彩霞;郭徽;劉雪婷;代煥琴
• 申請（專利權）人: 中國科學院微生物研究所
• 主分類號: C07D493/08
• 分類號: C07D493/08;C12P17/18;A61K31/357;A61P35/00;C12N1/20;C12R1/465
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

技術領域

本發明涉及生物技術領域，尤其涉及一種抗腫瘤化合物及其制備方法與應用。

背景技術

據世界衛生組織統計，癌癥是一個世界性的主要的死亡原因，全世界范圍內因癌癥而死亡的人數呈逐年遞增的態勢，2008年癌癥死亡人數達760萬(約占所有死亡人數的13％)，預計到2030年，全球癌癥死亡人數將增加45％。因此對于癌癥的治療來講面臨著非常嚴峻的挑戰。發現并研究具有高效、低毒的抗腫瘤藥物至關重要。

發明內容

本發明的一個目的是提供一種化合物。

本發明所提供的化合物，其結構式如式I所示：

式I。

本發明的另一個目的是提供上述化合物的制備方法。

本發明所提供的所述化合物的制備方法，包括如下步驟：

在液體培養基中發酵鏈霉菌(Streptomyces?sp.)LS1924?CGMCC?No.5240，得到發酵液；分離所述發酵液，即得到權利要求1所述的化合物。

所述液體培養基由以下成分組成：

葡萄糖、稷粉、棉籽蛋白粉、3-(N-嗎啉基)丙磺酸和水；

以上成分在所述液體培養基中的濃度分別為：

1升培養基中含5-15g葡萄糖、10-30g稷粉、10-30g棉籽蛋白粉和10-30g?3-(N-嗎啉基)丙磺酸，調pH?7.0-7.5，在本發明的實施例中具體為1升培養基中含10g葡萄糖、20g稷粉、20g棉籽蛋白粉和20g?3-(N-嗎啉基)丙磺酸，調pH?7.0。

所述分離所述發酵液的方法包括如下步驟：

1)先將所述發酵液離心，分別收集上清液和沉淀；

2)先將步驟1)得到的上清液經大孔吸附樹脂進行吸附層析，收集層析洗脫液，將步驟1)得到的沉淀用甲醇浸泡，收集甲醇提取液；再合并所述洗脫液和所述甲醇提取液，得到合并產物，即得到上述的化合物。

上述方法中，步驟1)中，所述離心為4℃8000轉/min(離心腔直徑45cm)離心15min；

步驟2)中，所述經大孔吸附樹脂進行吸附層析為將所述上清液流過大孔吸附樹脂進行吸附，再用洗脫緩沖液進行洗脫；

所述大孔吸附樹脂的型號為HP-20或X-5；

所述吸附層析的洗脫緩沖液為乙醇；

所述甲醇浸泡的時間為10小時，浸泡在室溫(25℃)下進行。

在上述分離后，還包括將所述合并產物依次進行如下純化的步驟：

A、將上述得到的合并產物進行硅膠柱層析分離，得到一次純化產物；

B、將步驟A得到的一次純化產物進行凝膠色譜分離，得到二次純化產物；

C、將步驟B得到的二次純化產物進行HPLC分離，得到式I所示化合物。

步驟A)中，所述硅膠柱層析分離為將所述合并產物流過硅膠柱以進行吸附，再用洗脫緩沖液進行洗脫，收集體積比為80∶20石油醚和丙酮混合液洗脫得到的洗脫液，即得到一次純化產物；

所述洗脫緩沖液為體積比為90∶10-50∶50的石油醚和丙酮混合液，所述洗脫為梯度洗脫；所述體積比為90∶10-50∶50的石油醚和丙酮混合液具體為體積比為90∶10石油醚和丙酮混合液、體積比為80∶20石油醚和丙酮混合液、體積比為70∶30石油醚和丙酮混合液、體積比為60∶40石油醚和丙酮混合液、體積比為50∶50石油醚和丙酮混合液；

步驟B)中，所述凝膠色譜分離為將所述一次純化產物流入凝膠柱，再用洗脫緩沖液進行洗脫，收集洗脫液，再經TLC分析，顯色的洗脫液即為二次純化產物；

所述凝膠柱為Sephadex?LH-20，所述洗脫緩沖液為體積比為1∶1的氯仿和甲醇混合液；

TLC分析的展層溶劑為體積比為3∶1的石油醚和丙酮混合液，TLC分析在254nm紫外光下監測。

步驟C)中，所述HPLC為將所述二次純化產物流過色譜柱以進行吸附，再用洗脫緩沖液進行洗脫，收集21.4min洗脫液，得到式I所示化合物；

所述HPLC的條件為Agilent?ZORBAX-XDB反相色譜柱，RP-C18，5μm，9.4*250mm，檢測波長254nm。

所述洗脫緩沖液為體積百分含量為65％的甲醇水溶液。

本發明的又一個目的是提供一種用于抗腫瘤的藥物。

本發明所提供的用于抗腫瘤的藥物，其活性成分為上述化合物。

上述化合物在制備抗腫瘤的藥物中的應用也屬于本發明的保護范圍。