[發(fā)明專利]轉(zhuǎn)基因玉米事件IE034外源插入片段旁側(cè)序列及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210065919.X
• 申請(qǐng)日: 2012-03-13
• 公開（公告）號(hào): CN102604940A
• 公開（公告）日: 2012-07-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王國(guó)英;劉允軍;張煜文;劉艷
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物科學(xué)研究所
• 主分類號(hào): C12N15/11
• 分類號(hào): C12N15/11;C12Q1/68
• 代理公司: 北京路浩知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11002
• 代理人: 王朋飛;王加嶺

1.抗蟲轉(zhuǎn)基因玉米事件(Zea?mays)IE034插入位點(diǎn)的外源插入片段的5’端旁側(cè)序列，其具有SEQ?ID?NO.1所示的序列或其特異性片段。

2.權(quán)利要求1所述的序列在檢測(cè)轉(zhuǎn)基因玉米中的應(yīng)用。

3.用于檢測(cè)權(quán)利要求1所述序列的特異性引物。

4.如權(quán)利要求3所述的引物，其核苷酸序列為：

IE034F：5’-AGGGGCTCCTCTGTTGTTGTA-3’，

IE034R：5’-TCGCTCATGTGTTGAGCATATAA-3’。

5.權(quán)利要求3或4所述的引物在制備檢測(cè)轉(zhuǎn)基因玉米試劑盒中的應(yīng)用。

6.一種檢測(cè)轉(zhuǎn)基因玉米事件IE034的方法，其特征在于，以樣品總DNA為模板，利用權(quán)利要求書3或4所述的引物進(jìn)行PCR反應(yīng)，根據(jù)PCR產(chǎn)物的電泳片段判斷結(jié)果。

7.如權(quán)利要求6所述的檢測(cè)方法，其特征在于，20μLPCR反應(yīng)體系為：10×PCR緩沖液2μL，10mmol/L?dNTP?0.4μL，5U/μl的taq酶0.4μL，玉米總DNA模板1.0μL，10μmol/L上游引物0.4μL，10μmol/L下游引物0.4μL，ddH₂O15.4μL。

8.如權(quán)利要求6所述的檢測(cè)方法，其特征在于，PCR反應(yīng)條件為：95℃5min；94℃30s，58℃30s，72℃1min，共35個(gè)循環(huán)；72℃7min。

9.一種檢測(cè)試劑盒，其特征在于，含有權(quán)利要求3或4所述的引物。

10.權(quán)利要求3或4所述引物或權(quán)利要求9所述的試劑盒在檢測(cè)轉(zhuǎn)基因玉米中的應(yīng)用。?