[發(fā)明專利]一種基于固態(tài)納米孔對核酸分子進(jìn)行減速及單分子捕獲的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210065833.7
• 申請日: 2012-03-13
• 公開（公告）號: CN102621214A
• 公開（公告）日: 2012-08-01
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 趙清;魯鉑;俞大鵬
• 申請（專利權(quán)）人: 北京大學(xué)
• 主分類號: G01N27/48
• 分類號: G01N27/48
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢

1.一種納米孔測序法中降低核酸分子穿孔速度的方法，包括下述步驟：將待測的核酸分子加入到盛有電解液的納米孔測序裝置中，所述納米孔測序裝置包括：設(shè)有正極和負(fù)極的電解池、以及分隔所述電解池正極和負(fù)極的固態(tài)納米孔薄膜；其特征在于：將所述待測的核酸分子置于所述電解池的正極腔室，測定時，向所述正極腔室引入壓強外場，作為核酸分子穿孔的驅(qū)動外場；并在正極和負(fù)極間施加電壓，作為與壓強外場反向的電場外場；測定過程中所述待測的核酸分子在納米孔中受到的壓強外場的作用力大于電場力。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述核酸分子為DNA、RNA或肽核酸。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述引入壓強外場產(chǎn)生的壓強為1.6-2.6個標(biāo)準(zhǔn)大氣壓，所述施加電壓的大小為40-160mv。

4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項所述的方法，其特征在于：所述電解液的濃度為0.1-3.2mol/L，pH值為8-10；所述固態(tài)納米孔薄膜中納米孔的直徑為10-20nm，孔深為20-100nm。

5.一種基于納米孔測序法對核酸分子進(jìn)行單分子捕獲的方法，包括下述步驟：將待測的核酸分子加入到盛有電解液的納米孔測序裝置中，所述納米孔測序裝置包括：設(shè)有正極和負(fù)極的電解池、以及分隔所述電解池正極和負(fù)極的固態(tài)納米孔薄膜；其特征在于：將所述待測的核酸分子置于所述電解池的正極腔室，測定時，向所述正極腔室引入壓強外場，作為核酸分子穿孔的驅(qū)動外場；并在正極和負(fù)極間施加電壓，作為與壓強外場反向的電場外場；測定過程中所述待測的核酸分子在納米孔中受到的壓強外場的作用力與電場力的合力為0或接近于0。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于：所述核酸分子為DNA、RNA或肽核酸。

7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的方法，其特征在于：所述引入壓強外場產(chǎn)生的壓強為1.6-2.6個標(biāo)準(zhǔn)大氣壓，所述施加電壓的大小為40-160mv。

8.根據(jù)權(quán)利要求5-7中任一項所述的方法，其特征在于：所述電解液的濃度為0.1-3.2mol/L，pH值為8-10；所述固態(tài)納米孔薄膜中納米孔的直徑為10-20nm，孔深為20-100nm。

9.一種基于納米孔測序法對核酸分子運動方向進(jìn)行調(diào)控的方法，包括下述步驟：將待測的核酸分子加入到盛有電解液的納米孔測序裝置中，所述納米孔測序裝置包括：設(shè)有正極和負(fù)極的電解池、以及分隔所述電解池正極和負(fù)極的固態(tài)納米孔薄膜；其特征在于：將所述待測的核酸分子置于所述電解池的正極腔室，測定時，向所述正極腔室引入壓強外場，作為核酸分子穿孔的驅(qū)動外場；并在正極和負(fù)極間施加電壓，作為與壓強外場反向的電場外場；測定過程中，通過調(diào)節(jié)所述待測的核酸分子在納米孔中受到的壓強外場的作用力與電場力的合力方向，實現(xiàn)對核酸分子穿孔、捕獲、釋放以及反向穿孔的操縱。

10.根據(jù)權(quán)利要求1-9中任一項所述的方法，其特征在于：所述核酸分子為長度低于1kb的DNA短鏈分子。