[發明專利]一種運用核酸恒溫擴增技術檢測梅毒螺旋體的試劑和檢測方法

無效

• 申請號: 201210065229.4
• 申請日: 2012-03-14
• 公開（公告）號: CN102618639A
• 公開（公告）日: 2012-08-01
• 發明（設計）人: 祁軍;劉振宇;李秀平;劉智勇;詹曦菁;劉啟軍;劉寅
• 申請（專利權）人: 中華人民共和國天津出入境檢驗檢疫局
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12Q1/04
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種運用核酸恒溫擴增技術檢測梅毒螺旋體的試劑和檢測方法，其特征在于，包括以下六個引物：

SEQ?ID?NO.1：

5’-CAGCACTCGTCTTCAACTCCTTGGTAGAAGGGAGGGCT

SEQ?ID?NO.2：

5’-GAGATCTTAGGCAGGATGTTATTCTACAGGGTCAGTAA

SEQ?ID?NO.3：5’-TGACAGAGTCTTCTGTGCTCACG

SEQ?ID?NO.4：5’-ACACCATTCGCACACGCGCAAT

SEQ?ID?NO.5：5’-GAGGTGAACTCCGTATT

SEQ?ID?NO.6：5’-AATGACCTGCACTGCGTG。

2.根據權利要求1所述的運用核酸恒溫擴增技術檢測梅毒螺旋體的試劑和檢測方法，其特征在于，核酸擴增反應體系中各組分構成比例如下：

其中Bst酶緩沖液的成分為20mM?Tris-HCl、10mM(NH₄)₂SO₄、10mM?KCl、2mM?MgSO4、質量百分比0.1％Triton?X-100、10mM?dNTP，且pH為8.8。

3.一種權利要求1所述的運用核酸恒溫擴增技術檢測梅毒螺旋體的試劑和檢測方法，其特征在于，核酸擴增程序為：

(1)63℃??????90分鐘；

(2)80℃??????2分鐘。

4.一種權利要求1所述的運用核酸恒溫擴增技術檢測梅毒螺旋體的試劑和檢測方法，其特征在于，將反應液中加入SYBR?Green染料，陽性結果呈綠色，陰性結果為棕黃色。

5.一種權利要求1所述的運用核酸恒溫擴增技術檢測梅毒螺旋體的試劑和檢測方法，其特征在于，吸取2μL反應液在含SYBR?Green染料的1％濃度(W/V)的瓊脂糖凝膠中電泳，可見陽性結果有呈階梯狀排列的電泳條帶，陰性結果則沒有。