[發(fā)明專利]用磁性固定化磷脂酶A1精煉毛油的方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201210065054.7 | 申請日： | 2010-11-10 |
| 公開（公告）號： | CN102559378A | 公開（公告）日： | 2012-07-11 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 于殿宇;王立琦;江連洲;朱秀清;王玉;于坤弘;常云鶴;孫博;劉晶;周曉丹;王妍;陳曉慧 | 申請（專利權(quán)）人： | 東北農(nóng)業(yè)大學(xué) |
| 主分類號： | C11B3/00 | 分類號： | C11B3/00 |
| 代理公司： | 哈爾濱市松花江專利商標(biāo)事務(wù)所 23109 | 代理人： | 韓末洙 |
| 地址： | 150030 黑龍*** | 國省代碼： | 黑龍江;23 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 磁性 固定 磷脂酶 sub 精煉 方法 | ||
本發(fā)明專利申請是由申請?zhí)枮?01010538226.9，申請日為2010年11月10日，發(fā)明名稱為“磁性固定化磷脂酶A1的制備方法及用磁性固定化磷脂酶A1精煉毛油的方法”的發(fā)明專利的分案申請。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及一種用固定化磷脂酶A1精煉毛油的方法。
背景技術(shù)
固定化酶在保持其高效專一及溫和的酶催化反應(yīng)特性的同時，又克服了游離酶的不足之處，呈現(xiàn)貯存穩(wěn)定性高、分離回收容易、可多次重復(fù)使用、操作連續(xù)可控、工藝簡便等優(yōu)點(diǎn)。固定化酶在化學(xué)、生物學(xué)及生物工程、醫(yī)學(xué)及生命科學(xué)領(lǐng)域廣泛應(yīng)用。使用現(xiàn)有方法制備固定化磷脂酶A1存在固定化酶分離回收困難，活力回收率低(一般為40％～60％)的問題。
植物油脂中的膠質(zhì)主要是磷脂混合物，脫膠是植物油精煉中非常重要的工序，脫膠效果好壞將直接影響精煉效率和產(chǎn)品質(zhì)量；若脫膠不完全，則會加重脫色負(fù)擔(dān)，影響油脂質(zhì)量和精煉經(jīng)濟(jì)效益。植物油磷脂可分為水化磷脂和非水化磷脂，水化磷脂具有親水性，可通過水化方法脫除，而非水化磷脂具有明顯的疏水性，在水化脫膠中較難與水結(jié)合，其存在會給油脂精煉帶來很多麻煩。
現(xiàn)已提出用游離酶法水解脫除非水化磷脂，但在實(shí)際生產(chǎn)中發(fā)現(xiàn)游離磷脂酶對反應(yīng)環(huán)境敏感，易變性失活，反應(yīng)條件不易控制。因此將酶進(jìn)行固定化，可提高它的穩(wěn)定性和利用效率。目前尚沒有將磁性固定化酶用于精煉毛油的報(bào)道。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是為了解決現(xiàn)有方法制備固定化磷脂酶A1存在固定化酶分離回收復(fù)雜，活力回收率低，及目前尚沒有將磁性固定化酶用于精煉毛油的問題，而提供一種磁性固定化磷脂酶A1的制備方法及用磁性固定化磷脂酶A1精煉毛油的方法。
本發(fā)明的磁性固定化磷脂酶A1的制備方法，按以下步驟進(jìn)行：一、制備Fe3O4納米粒子；二、制備Fe3O4/SiOx復(fù)合粒子；三、制備Fe3O4/SiOx-APTS載體；四、制備磁性Fe3O4/SiOx-g-P(GMA)復(fù)合粒子；五、將磁性Fe3O4/SiOx-g-P(GMA)復(fù)合粒子加入到0.1mol/L且pH值為7～7.2的磷酸緩沖液中浸泡24～26h，然后進(jìn)行磁分離，得浸泡后的載體；六、將磷脂酶A1加入0.1mol/L且pH值為5.5～9.5的磷酸緩沖液中，制成質(zhì)量濃度為0.2％的磷脂酶A1磷酸緩沖液，然后將浸泡后的載體加入到12～88mL磷脂酶A1磷酸緩沖液中，在10～50℃下用磁力攪拌器攪拌2～9h，攪拌速度為10～12r/min，然后進(jìn)行磁分離，用0.1mol/L且pH值為7～7.2的磷酸緩沖液沖洗2～3次，即得到磁性固定化磷脂酶A1；其中步驟五中每克磁性Fe3O4/SiOx-g-P(GMA)復(fù)合粒子加入到48～50mL磷酸緩沖液中。
利用上述的磁性固定化磷脂酶A1精煉毛油的方法，按以下步驟進(jìn)行：一、使用水化脫膠法脫除毛油中的水化磷脂，得到除去水化磷脂的毛油，將除去水化磷脂的毛油進(jìn)行水浴加熱至70～90℃，加入質(zhì)量濃度為40％～50％的檸檬酸溶液，混勻，檸檬酸溶液的質(zhì)量為除去水化磷脂的毛油質(zhì)量的0.1％～2％，在攪拌速度為400～600r/min的條件下反應(yīng)10～30min；二、然后冷卻至30～70℃，加入質(zhì)量濃度為3％～5％NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值至3～9，再加入磁性固定化磷脂酶A1，每千克除去水化磷脂的毛油加入0.04～0.16g的磁性固定化磷脂酶A1，于攪拌速度為40～120r/min下反應(yīng)1～6h，用磁鐵將磁性固定化磷脂酶A1與除去水化磷脂的毛油分離，即得到脫膠油。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)：
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